運(yùn)輸和保存:
人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2009圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2009圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞1983年建系,源自68歲肺腺癌女性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。
培養(yǎng)條件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 5%FBS;0.005 mg/ml Insulin + 0.01 mg/ml Transferrin + 30nM Sodium selenite + 10 nM Hydrocortisone + 10 nM beta-estradiol + extra 2mM L-glutamine
傳代方法
傳代情況 P25
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:10,12;D13S317:12;D16S539:12;D18S51:14;D19S433:14,16,17;D21S11:29;D2S1338:16,19;D3S1358:16;D5S818:13;D7S820:9,11;D8S1179:10,15;FGA:22;TH01:9.3;TPOX:8;vWA:14;
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

C12ORF4 12號(hào)染色體開放閱讀框4抗體 0.2ml
CD93/C1qrp CD93抗體 0.2ml
GMRP1/BTBD10 糖代謝相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
phospho-AXL (Tyr698+Tyr702+Tyr703) 磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體 0.1ml
HIV-1 ENV(gp160) 艾滋病病毒-1包膜糖蛋白抗體 0.1ml
FGF13 纖維母細(xì)胞生長因子13抗體 0.2ml
CREB-1 環(huán)腺苷酸應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
synaptotagmin-2 突觸結(jié)合蛋白相關(guān)基因2抗體 0.1ml
Rap2A Rap2A抗體 0.2ml
TRIM11/RNF92 環(huán)指蛋白92抗體 0.2ml
GLP-1R 胰高血糖素樣肽-1受體抗體 0.1ml
亞油酸甲酯 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: GC法含量測定
5-羥甲基 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
沙棘油 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2009圖片2”-O-沒食子酰基金絲桃苷 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
射干苷 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
糠酸 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
α-亞麻酸 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
羥基紅花黃色素A 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
正十八烷 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 內(nèi)標(biāo)物
蛻皮甾酮 英文名稱 對(duì)照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2009圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H2009圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);