
細(xì)胞名稱
人大細(xì)胞肺癌順鉑耐藥株;NCI-H460/cis說明書
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D12S391:21,21;D13S317:13,13;D16S539:9,9;D18S51:13,15;D19S433:14,14;D21S11:30,30;D2S1338:17,25;D3S1358:15,18;D5S818:9,10;D6S1043:11,14;D7S820:9,12;D8S1179:12,12;FGA:21,23;Penta E:5,5;TH01:9.3,9.3;TPOX:8,8;vWA:17,17;
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人大細(xì)胞肺癌順鉑耐藥株;NCI-H460/cis說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人大細(xì)胞肺癌順鉑耐藥株;NCI-H460/cis說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人大細(xì)胞肺癌順鉑耐藥株;NCI-H460/cis說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗牛IgM 0.1ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
Collagen III 抗Ⅲ型膠原抗體 Collagen Ⅲ 0.1ml
Bone sialoprotein 骨涎蛋白抗體 0.1ml
Nonylphenol 抗體 1ml
CDK14/PFTK1 周期蛋白依賴性激酶14抗體 0.2ml
CCDC160 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白160抗體 0.2ml
Phospho-Rb(Ser612) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
FRK/PTK5 胃腸道相關(guān)酪氨酸激酶抗體(蛋白酪氨酸激酶5) 0.2ml
5-HTR4 5-羥色胺受體4抗體 0.1ml
Myf6 生肌調(diào)節(jié)因子6抗體 0.2ml
香附 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121059-200706
金銀花 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121060-200906
水蛭(螞蟥) 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121061-200503
芫花 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121062-200602
人大細(xì)胞肺癌順鉑耐藥株;NCI-H460/cis說明書川牛膝 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121065-201004
槐花 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121063-200702
羚羊角 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121064-0301
蘇木 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121067-200604
牛膝 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121066-200504
杜仲葉 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 121068-9901