運(yùn)輸和保存:
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838培養(yǎng)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞于1984年建系,源于一位59歲患有非小細(xì)胞肺癌的白人男性吸煙者,從患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶分離而來。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體 38~53
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

PDSS2 抑癌蛋白DLP1抗體 0.2ml
ErbB-3/HER3 表皮生長(zhǎng)因子受體3抗體 0.1ml
GAP43 神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43 0.1ml
OLFM1 嗅球蛋白1抗體 0.2ml
TSPAN1 四分子交聯(lián)體1抗體(四旋蛋白) 0.2ml
HHLA2 HHLA2蛋白抗體 0.2ml
RIPK3 受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶3抗體 0.1ml
Cyclophilin B 親環(huán)蛋白PPIB抗體 0.2ml
BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體 0.2ml
Donkey Anti-Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
CD5L/Api6 CD5L抗體 0.2ml
仙茅苷 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110771-200904
百秋李醇 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110772-200404
阿魏酸 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110773-200611
青藤堿 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110774-200206
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838培養(yǎng)柴胡皂苷 a 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110777-200507
胡椒堿 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110775-200203
香草酸 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110776-200402
氧化苦參堿 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110780-200405
柴胡皂苷 d 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110778-200506
黃芪甲苷 英文名稱 含量測(cè)定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 110781-200613
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H838培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);