人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；Y79培養(yǎng)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70)  磷酸化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
NGB/neuroglobin  腦紅蛋白/神經(jīng)血紅蛋白/神經(jīng)球蛋白抗體 0.1ml
BRCA1/BAP1  乳腺癌易感基因1抗體 0.1ml
C3orf18  3號染色體開放閱讀框18抗體 0.2ml
phospho-IKK beta(S474)  磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml
KCNC4/KV3.4  離子通道蛋白Kv3.4抗體 0.2ml
CCDC98  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白98抗體 0.2ml
HEF1  蛋白激酶底物相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
Wnt3a  信號通路Wnt3a抗體 0.1ml
phospho-Smad3(Ser213)  磷酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 0.1ml
BBC3/PUMA  p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體 0.1ml
細(xì)辛脂素 英文名稱 Asarinin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥95%
夏佛塔苷 英文名稱 Schaftoside  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 95%
仙茅苷 英文名稱 curculigoside  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 98%
人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；Y79培養(yǎng)腺苷 英文名稱 Adenosine  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 98%
香素 英文名稱 coumarin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%
相思豆堿 英文名稱 alpha-Methyl-L(+)-tryptophan  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 95%
香草酸 英文名稱 Vanillic acid  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 98%
香蒲新苷 英文名稱 Typhaneoside  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%
香蘭素 英文名稱 Vanillin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%
香葉木素 英文名稱 Diosmetin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 95%

（1）人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；Y79培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤；Y79培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；