
細(xì)胞名稱
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞;Caki-2說明書
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞源自一位69歲白人男性的初期腎腺癌組織
培養(yǎng)條件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 10%FBS
傳代方法 1:3~1:6傳代,2~3天換液一次
傳代情況 P31
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:10;D16S539:9,13;D18S51:17;D19S433:13,14;D21S11:27,31;D2S1338:17,20;D3S1358:14;D5S818:11;D7S820:12;D8S1179:10;FGA:22;TH01:6;TPOX:9,11;vWA:16,17;
同工酶
染色體 亞五倍體,亞六倍體
運(yùn)輸和保存:
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞;Caki-2說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞;Caki-2說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞;Caki-2說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

WBSCR14/ChREBP 糖類應(yīng)答元件結(jié)合蛋白ChREBP抗體 0.2ml
Glutamine synthetase/GLUL/GS 谷氨酰胺合成酶/谷氨酸氨連接酶抗體 0.1ml
OMPC 大腸桿菌外膜孔道蛋白C抗體 0.1ml
Salmonella enteritidis H 傷寒沙門氏菌鞭毛抗原H抗體 0.2ml
CKLFH5/CMTM5 趨化素樣因子超家族成員5抗體 0.2ml
phospho-GAB2(Ser623) 磷酸化接頭蛋白Gab2抗體 0.1ml
Wnt8b WNT蛋白家族Wnt8b抗體 0.2ml
APOA2 載脂蛋白A2抗體 0.1ml
Phospho-PKR (Thr451) 磷酸化蛋白激酶R抗體 0.1ml
SEL1L SEL1L抗體 0.1ml
SYTL5/slp5 突觸樣蛋白5亞型2抗體 0.1ml
五味子醇乙 英文名稱 Schisandrol B 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
煙酰胺 英文名稱 Nicotinamide 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥99.5%
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞;Caki-2說明書西紅花苷(藏紅花素,番紅花苷) 英文名稱 Crocin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: Standard(標(biāo)準(zhǔn))
西紅花苷I 英文名稱 Crocin I 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥97%
D-(-)-奎寧酸 英文名稱 D-(−)-Quinic acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
西紅花苷II 英文名稱 Crocin II 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
桑色素 英文名稱 Morin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
根皮苷 英文名稱 phloridzin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥99%
梓醇 英文名稱 catalpol 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%
蛻皮激素 英文名稱 Ecdysterone 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: HPLC≥98%