細(xì)胞名稱 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H524培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞1982年建系，源自非小細(xì)胞肺癌男性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
傳代方法
傳代情況 P21
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：12；D16S539：12；D18S51：12，13；D19S433：16；D21S11：29，30；D2S1338：16，17；D3S1358：15；D5S818：12；D7S820：11，12；D8S1179：13，15；FGA：21，22，25；TH01：8，9.3；TPOX：8，10；vWA：14，17；
同工酶
染色體

運(yùn)輸和保存：

人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H524培養(yǎng)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H524培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H524培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

ATAD5  染色體脆弱性相關(guān)基因抗體 0.2ml
CACNA1G/Cav3.1  電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體 0.1ml
phospho-PIK3R1(Tyr556)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/AP  堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
Slc22a5  溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體 0.2ml
NEU4  神經(jīng)氨酸酶4抗體 0.2ml
Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)  磷酸化叉頭蛋白家族抗體 0.1ml
FGF5  纖維母細(xì)胞生長因子5抗體 0.1ml
phospho-Crkl(Tyr244)  磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 0.1ml
PNPO  磷酸吡哆醇氧化酶抗體 0.2ml
FGF18  成纖維細(xì)胞生長因子18抗體 0.2ml
脫水差向四環(huán)素 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 檢查
4-差向金霉素 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 檢查
β-多西環(huán)素 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 雜質(zhì)檢查
頭孢吩 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H524培養(yǎng)氨芐西林 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定
頭孢氨芐 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定
阿莫西林 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定
頭孢酮S異構(gòu)體 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 檢查
新霉胺 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 檢查
醌式利福平 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 檢查