
細胞名稱
人羊膜細胞;WISH培養
形態特性 上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 最初以為這株細胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析,證實該細胞是HeLa細胞污染的;角蛋白陽性。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:10傳代;每周換液2次。
傳代情況 P180
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:9,10;D13S317:13.3;D16S539:9,10;D18S51:16;D19S433:13,14;D21S11:27,28;D2S1338:17;D3S1358:15,18;D5S818:11,12;D7S820:8,12;D8S1179:12,13;FGA:21;TH01:7;TPOX:8,12;vWA:16,18;
同工酶
染色體 70~75,有若干變異染色體
運輸和保存:
人羊膜細胞;WISH培養視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿完全培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
可以重發的情況有哪些?
(1)人羊膜細胞;WISH培養細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
(5)視具體情況而定。
出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)人羊膜細胞;WISH培養客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)細胞狀態不好,未細胞培養前3天照片的,不重發;
(4)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發;
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

C1orf67/DNAH14 1號染色體開放閱讀框67抗體 0.2ml
LC3B/MAP LC3β/MAP1A 自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體 0.1ml
AKR1A1 乙醇脫氫酶1抗體 0.2ml
RNF43 環指蛋白43抗體 0.2ml
XBP-1 細胞核轉錄因子X盒結合蛋白抗體 0.1ml
FGFR4/CD334 成纖維細胞生長因子受體4抗體 0.1ml
VAM1/MPP6 棕櫚酰化膜蛋白6抗體 0.2ml
phospho-IKK beta(Tyr188) 磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗體 0.1ml
phospho-ASK1(Ser1033) 磷酸化細胞凋亡信號調節激酶1抗體 0.1ml
DIS3L 有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體 0.2ml
CCDC21 卷曲螺旋結構域蛋白21抗體 0.2ml
蔓荊子黃素 英文名稱 Casticin (Vitexicarpin) 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
芒柄花素 刺芒柄花素 英文名稱 Formononetin 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
芒柄花素-7-O-葡萄糖苷 英文名稱 Fomononetin-7-O-glucoside/ononin 規格: 20mg/支進口/國產 含量: 95%
芒果苷 英文名稱 Mangiferin 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥95%
毛蕊異黃酮 英文名稱 Calycosin 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
人羊膜細胞;WISH培養莽草酸 英文名稱 Shikimic Acid 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
毛蕊花糖苷(麥角甾苷) 英文名稱 Verbascoside 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%
沒食子兒茶素GC 英文名稱 (−)-Gallocatechin 規格: 20mg/支進口/國產 含量: 97%
毛蕊異黃酮-7-O-β-D葡萄糖苷 英文名稱 calycosin-7-O-β-D-glucoside 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥97% 96%
沒食子兒茶素沒食子酸酯/ GCG 英文名稱 -GCG 規格: 20mg/支進口/國產 含量: ≥98%