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考馬斯亮藍G-250染液產品及特點
考馬斯亮藍G250是最經典的SDS-PAGE染色方法,本產品就是基于此方法而開發的產品。它具有下列特點:
1. 即開即用,不需要自己單獨準備所有溶液。
2. 不需昂貴儀器,肉眼即可觀察結果,不象其他納克級的染色方法需要貴重的儀器設備(如SYPRO系列的高靈敏度的熒光染料需要熒光成像系統)。
3. 與普通掃描儀等兼容,便于保存數據和后續處理。
4. 靈敏度略高于考馬斯亮藍R250染色液。
使用及效果
凝膠電泳停止后,切除濃縮膠, 轉移分離膠至染色容器中。倒入30-40 mL溶液A,1mm和1.5mm厚PAGE膠,搖床分別震蕩10-15分鐘和2-3小時。 棄掉溶液A,加入15-20 mL溶液B,1mm和1.5mm厚PAGE膠,搖床分別震蕩30-60分鐘和2-3小時。棄掉溶液B,加入30-40 mL10%的乙酸,緩慢搖動,直到出現亮藍色的蛋白條帶。常規掃描或保存。
考馬斯亮藍G-250染液細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
考馬斯亮藍G-250染液質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
考馬斯亮藍G-250染液(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY100818MDS 42rec A trf A菌種1mLXY100819MDS 42T7lac 菌種1mLXY70602DNA快速連接試劑盒30次|100次XY90801一站式TA克隆試劑盒20次(A)|20次(B)XY131126一站式平末端克隆試劑盒20次XY130827小RNA克隆試劑盒10次XY130681通用 miRNA 克隆接頭0.83nmolXY51101常態轉化液20次XY50901菌落PCR試劑盒2.050次XY100884IPTG干粉2.5gXY80909IPTG溶液1.5mLXY100885X-Gal干粉0.5gXY80910X-Gal溶液10mLXY70803免質粒提取篩選試劑盒1000次XY60404超級培養基100mLXY100602干粉型LB培養基250gXY100820干粉型LB-Lennox培養基250gXY100821干粉型2×YT培養基250gXY100822干粉型SB培養基250gXY100813干粉型SOB培養基250gXY100823干粉型SOC培養基250gXY100825自誘導培養基(lac啟動子)200mLXY100824干粉型TB培養基250gXY100826穿刺培養基10管XY100827菌種保存液10管(A)|10管(B)XY130895YPD液體培養基100mLXY130896YPG液體培養基100mLXY130897YPDG液體培養基100mLXY130898MAL指示劑培養基100mLXY130899GAL指示劑培養基100mL