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非變性蛋白分子量標準產(chǎn)品及特點
非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native PAGE)是目前電泳法分離活性蛋白的主要方法之一，跟SDS-PAGE根據(jù)分子量大小分離蛋白質不同，它是根據(jù)蛋白質分子大小、形狀、電荷密度三個主要參數(shù)分離蛋白質。對于同等分子量的蛋白而言，它的電泳遷移速率不僅決定于丙烯酰胺濃度，而且與它本身的電荷有關。在固定pH條件下，蛋白所帶電荷越高，它的遷移速率就越大。本產(chǎn)品為非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳專用Marker，Marker的分子量范圍從12.4 Kd到450 KD，其條帶信息如下：
本產(chǎn)品具有下列特點：
1. 產(chǎn)品中所含蛋白都是天然蛋白，穩(wěn)定性強。因蛋白純度受到提取方法限制，電泳中可能會出現(xiàn)其他雜帶，但不影響實驗結果。
2. 本產(chǎn)品中的8種組分是獨立提供，實驗中可以根據(jù)不同要求選擇不同組分，每種組分的質量為25 mg。
3. 本產(chǎn)品只能用于非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳(Native PAGE)，不能用于SDSPAG。
4. 部分條件下，有些蛋白Marker條帶可能沒有出現(xiàn)。如：在pH 8.8時，等電點分別為10.7 和 9.2-9.6 的細胞色素C和胰凝乳蛋白酶原A不會出現(xiàn)在電泳膠中。
使用及效果
詳細使用步驟請參見產(chǎn)品使用手冊。
非變性蛋白分子量標準細菌的培養(yǎng)和收集：
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。
非變性蛋白分子量標準質粒DNA少量快速提取：
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
非變性蛋白分子量標準（一）、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。
2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY13122710 nt隨機引物5μgXY1206796nt隨機引物(抗水解)100μLXY80206兩管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY91202雙酶一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY130609一步式RT-PCR Mix1mLXY130957免RNA提取RT-PCR試劑盒100次XY101219即用型熒光定量RT-PCR試劑盒50次XY100941通用型全基因組擴增試劑盒30次XY100938單細胞全基因組擴增試劑盒30次XY100940石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30次XY100942單孢子全基因組擴增試劑盒30次XY100947環(huán)狀DNA全基因組擴增試劑盒30次XY100203通用型LAMP試劑盒50次XY101114通用型RT-LAMP試劑盒50次XY130923LAMP擴增陽性對照50次XY130833LAMP可見光染料1mLXY131179核酸稀釋液，測OD專用100mLXY131083Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒20次XY91106T7體外轉錄試劑盒50次(A)|50次(B)
