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長效期SDS-PAGE還原劑產品及特點
在蛋白質PAGE電泳中,還原劑的作用是打斷二硫鍵,可以使蛋白質變性。但是在常規的SDS-PAGE中只有上樣液中含有還原劑,PAGE膠中并沒有還原劑,蛋白質會在電泳過程中重新形成二硫鍵,因此電泳條帶不清晰。本產品可以克服蛋白電泳此缺點。將本品加入到電泳液中,使蛋白在電泳過程中無法重新形成二硫鍵。
常溫運輸、4℃保存,有效期一年。
長效期SDS-PAGE還原劑細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
長效期SDS-PAGE還原劑質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
長效期SDS-PAGE還原劑(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY131158熒光素488標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131159熒光素555標記山羊抗兔IgG0.1mgXY131160異硫氰酸熒光素標記山羊抗小鼠IgG0.1mgXY131161山羊抗小鼠IgG,藻紅蛋白標記0.1mgXY100841β-巰基乙醇1.5mLXY100881SDS溶液(10%,電泳級)100mLXY90311電泳級Tricine干粉100gXY111007MALDI蛋白樣品處理試劑盒500次
工具酶
XY51206Taq DNA聚合酶500U|5000UXY120401熱啟動Taq DNA聚合酶100UXY130606抗干擾Taq DNA 聚合酶100次XY130910Long-Taq DNA聚合酶500UXY90501Tth DNA聚合酶250UXY51207Pfu DNA聚合酶100UXY130429Phusion DNA聚合酶250UXY101002KOD DNA聚合酶250UXY131037Tfl DNA聚合酶100UXY130430E.coli DNA聚合酶 Ι500UXY100937φ29 DNA聚合酶250UXY120411T4 DNA 聚合酶50U