蛋白磷酸酶抑制劑混合液2產品及特點

組織/細胞裂解時會釋放出大量內源性蛋白磷酸酶，催化磷酸化蛋白的去磷酸化，導致不同于正常生理狀態的差異，影響實驗結果。因此，加入外源性蛋白磷酸酶抑制劑，抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，維護蛋白質的磷酸化狀態，是Western Blot、免疫共沉淀檢測磷酸化蛋白質、和蛋白激酶活性測定等研究部可缺少的一步。本產品就是針對這一用途開發：
1. 即開即用，不需要單獨購買每個成分再配制。
2. 抑制譜廣，由多種蛋白磷酸酶抑制劑組成，能特異性地抑制酪氨酸磷酸酶、酸性磷酸酶和堿性磷酸酶。
3. 本產品為優化的蛋白磷酸酶抑制劑混合水溶液。與各種細胞裂解液兼容，在裂解液中加入1/100體積即可。
低溫運輸，4℃保存，有效期兩年。

蛋白磷酸酶抑制劑混合液2細菌的培養和收集：

將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。

蛋白磷酸酶抑制劑混合液2質粒DNA少量快速提取：

質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　蛋白磷酸酶抑制劑混合液2（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY001結核桿菌熒光定量PCR檢測試劑盒 TB40/96次XY002牛病毒性腹瀉/粘膜病病毒熒光定量PCR檢測試劑盒 BVDV40/96次XY003牛傳染性鼻氣管炎病毒熒光定量PCR檢測試劑盒 IBRV40/96次XY004布魯氏菌熒光定量PCR檢測試劑盒 BS40次/盒XY005炭疽桿菌熒光定量PCR檢測試劑盒 BA40次/盒XY006口蹄疫通用型熒光定量PCR檢測試劑盒 FMDV40次/盒XY007口蹄疫A型熒光定量PCR檢測試劑盒 FMDV-A40次/盒XY008口蹄疫O型熒光定量PCR檢測試劑盒 FMDV-O40次/盒XY009口蹄疫亞I型熒光定量PCR檢測試劑盒 FMDV-I40次/盒XY010副結核熒光定量PCR檢測試劑盒 paratuberculo sis40次/盒XY001禽流感病毒(即A型禽流感)通用型熒光定量PCR檢測試劑盒 AIV-M40/96次XY002禽流感病毒H5亞型熒光定量PCR檢測試劑盒 AIV-H540/96次XY003禽流感病毒N1亞型熒光定量PCR檢測試劑盒 AIV-N140/96次XY004禽流感病毒H7亞型熒光定量PCR檢測試劑盒 AIV-H740/96次XY004-1禽流感病毒H7N9熒光定量PCR檢測試劑盒 AIV-H7N924/40次

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