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銷售商: 上海信裕生物工程有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
改良Lowry法蛋白定量試劑盒產品及特點
Folin酚試劑(磷鉬酸和磷鎢酸混合物)跟蛋白質中含酚氨基酸(色氨酸和酪氨酸)發生顏色反應,可用于測定蛋白質濃度,但靈敏度較低。Lowry在此基礎上加入Biuret(雙縮脲)反應步驟,即先在堿性條件下使蛋白質和Cu+形成復合物,再使其與Folin酚試劑發生顯色反應,產物在750nm檢測。Lowry法使不含酚的蛋白質也能被檢測出來,靈敏度是單獨使用Folin酚的10倍左右,是雙縮脲反應的200倍,因此成為早期檢測蛋白濃度的主要方法。Lowry檢測原理圖如下:傳統Lowry法受到很多常用的試劑(如DTT、糖、甘油、Triton等)干擾,步驟繁瑣。本公司對Lowry法進行改良,推出本產品,它具有下列特點:
1. 即開即用,不需要單獨購買每個成分再配制。
2. 可室溫操作,適合高通量定量,只需要三種溶液(經典Lowry法需5種溶液)。
3. 檢測線性范圍廣,在2-100 μg,檢測上限比經典Lowry法高30%-40%。
4. 可排除去污劑的影響。
使用及效果
將溶液A、溶液B、溶液C按3:1:1的比例混合得Lowry工作液,再將福林酚稀釋10倍得福林酚工作液,將0.2 mL Lowry工作液、0.1 mL 福林酚工作液和0.2 mL待測樣品混合,室溫放置30分鐘后測定750 nm吸光度,與標準曲線對比即得蛋白質濃度。下圖是用本產品測定BSA和BGG(牛血清γ-球蛋白)的結果圖。
改良Lowry法蛋白定量試劑盒細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
改良Lowry法蛋白定量試劑盒質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
改良Lowry法蛋白定量試劑盒(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY131223Zenker固定液2LXY131224Helly固定液2LXY131225Carnoy固定液2LXY131200細胞計數液(Vi-CELL儀專用)100次XYpyj19細胞培養基1套XYygtz22熒光探針和示蹤劑1瓶XYfly100細胞分離液1瓶XYydyz23細胞凋亡誘導劑和抑制劑1瓶XY100407人淋巴細胞分離液A型100mLXY90307青鏈霉素溶液100mLXY131134Percoll100mLXY131136Ficoll-Paque介質100mLXY100601細胞核微量制備試劑盒50次XY111207動物線粒體純化試劑盒15次(A)|15次(B)XY111208植物線粒體純化試劑盒15次(A)|15次(B)XY120308植物葉綠體純化試劑盒15次XY100410超快轉染試劑盒1mLXY130821阿爾瑪藍細胞增殖與細胞毒檢測試劑100次|500次XY111105MTT檢測試劑盒500次XY121205CCK-8細胞增殖及毒性檢測試劑盒5mL