 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||
| [發(fā)表評論] [本類其他產(chǎn)品] [本類其他供應商] [收藏] | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 銷售商： 上海信裕生物工程有限公司 | 查看該公司所有產(chǎn)品 >> |
BCA法蛋白定量試劑盒產(chǎn)品及特點
本產(chǎn)品是基于BCA法（bicinchoninic acid，二奎啉甲酸法）蛋白檢測原理開發(fā)的蛋白質(zhì)濃度測定產(chǎn)品，BCA法跟Lowry法的第一步完全相同，就是在堿性條件下，藍色的Cu2+被蛋白質(zhì)還原成紫色的Cu+。此反應類似Cu2+與Biuret（NH2-CO-NH-CONH2，雙縮脲）發(fā)生的反應，故又叫Biuret反應（Biuret反應本身就可以測定蛋白質(zhì)濃度，目前仍然是醫(yī)院血液蛋白定量的方法）。第二步，Cu+與BCA發(fā)生反應形成水溶性的紫色化合物，通過分光在562 nm處測定紫色化合物的量就可以精確定量蛋白質(zhì)濃度，增加BCA反應這一步的原因是BCA檢測靈敏度比Biuret反應高100倍左右。
BCA反應
1. 對大多數(shù)離子型和非離子型去污劑不敏感，但對Cu的還原劑和螯合劑敏感。
2. 比Lowry法更加簡單快捷，45分鐘內(nèi)完成測定。
3. 試劑穩(wěn)定，室溫可以放置兩年，工作液1天內(nèi)有效。
4. 線性范圍在 20-2000 μg/mL（對BSA）。
5. 最小測量體積為1-20 μL。最低測量蛋白量為5 μg/mL。
6. 終產(chǎn)物穩(wěn)定，檢測不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。
7. 最短可以檢測雙肽，所以適合于分子量較小的蛋白質(zhì)，而Bradford法需要一定大小的蛋白質(zhì)。
8. 有常規(guī)（普通試管）和微量（96孔板）兩種檢測模式。
BCA法蛋白定量試劑盒細菌的培養(yǎng)和收集：
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。
BCA法蛋白定量試劑盒質(zhì)粒DNA少量快速提取：
質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
BCA法蛋白定量試劑盒（一）、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。
2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY60203硫酸新霉素干粉1gXY120695新生霉素溶液5mLXY120694制霉菌素溶液10mLXY120696土霉素鹽酸鹽溶液10mLXY120697青霉素G鉀鹽溶液1MuXY120698青霉素G鈉鹽溶10mLXY120699多粘菌素 B 硫酸鹽5mLXY100840嘌呤霉素干粉25mgXY120700利福平溶液10mLXY131232壯觀霉素溶液10mLXY120701鏈脲佐菌素溶液10mLXY60210硫酸鏈霉素溶液10mLXY60209鹽酸四環(huán)素溶液10mLXY120702衣霉素溶液1mLXY60301鹽酸四環(huán)素干粉1gXY120703鹽酸萬古霉素溶液10mL
探針標記及檢測
XY90603隨機引物法DNA探針標記試劑盒5次(A)XY90604PCR法DNA探針標記試劑盒5次(A)XY90605TdT加尾法DNA探針標記試劑盒5次(A)XY131036DNA 5’末端標記試劑盒10次XY100210dNTP溶液(標記專用)0.5mLXY100920生物素標記dUTP溶液50μLXY100921地高辛標記dUTP溶液25μLXY120631Aminoally-dUTP溶液100μLXY120630Fluorescein -12- dUTP溶液25μL
