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重組蛋白G產(chǎn)品及特點(diǎn)
從金黃色葡萄球菌中純化的天然蛋白A46.7kDa( 無標(biāo)記物);SDS-PAGE 表觀分子量42kDa 包含四個(gè)Fc 結(jié)合結(jié)構(gòu)域?qū)ν谩⒇i、狗和貓血清來源的多克隆IgG效果最佳對(duì)小鼠IgG1、人IgG3、大鼠、山羊和牛效果不佳
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
重組蛋白G細(xì)菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長后期。
重組蛋白G質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
重組蛋白G(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。
8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。
XY130308一管式雙鏈cDNA合成試劑盒10次XY100814Oligo dT12-18引物5μgXY1004096 nt隨機(jī)引物5μgXY13122710 nt隨機(jī)引物5μgXY1206796nt隨機(jī)引物(抗水解)100μLXY80206兩管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY91202雙酶一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY130609一步式RT-PCR Mix1mLXY130957免RNA提取RT-PCR試劑盒100次XY101219即用型熒光定量RT-PCR試劑盒50次XY100941通用型全基因組擴(kuò)增試劑盒30次XY100938單細(xì)胞全基因組擴(kuò)增試劑盒30次XY100940石蠟包埋組織全基因組擴(kuò)增試劑盒30次XY100942單孢子全基因組擴(kuò)增試劑盒30次XY100947環(huán)狀DNA全基因組擴(kuò)增試劑盒30次XY100203通用型LAMP試劑盒50次XY101114通用型RT-LAMP試劑盒50次XY130923LAMP擴(kuò)增陽性對(duì)照50次XY130833LAMP可見光染料1mL