考馬斯亮藍(lán)G-250產(chǎn)品及特點(diǎn)

考馬斯亮藍(lán)G-250（Coomassie BrilliantBlue R-250） 是考馬斯亮藍(lán)系列染料中的一種，G 表示其干粉顏色是藍(lán)色偏綠，250 表示其純度。其鈉鹽的分子式是C47H48N3O7S2Na，分子量為854。在酸性條件下，染料的硫酸基團(tuán)能跟快速蛋白的堿性氨基酸結(jié)合并發(fā)生管關(guān)光譜偏移（最大光吸收變成595nm），并且結(jié)合量跟蛋白濃度成正比，故常用于Bradford 法蛋白定量。考馬斯亮藍(lán)G-250 比R-250 多兩個(gè)甲基基團(tuán)，不能直接替換使用。

常溫運(yùn)輸和保存，有效期一年。

考馬斯亮藍(lán)G-250細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長后期。

考馬斯亮藍(lán)G-250質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　考馬斯亮藍(lán)G-250（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY70604miRNA PAGE膠回收試劑盒40次XY80203柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒50次XY81105瓊脂糖100gXY130835低熔點(diǎn)瓊脂糖2.5g|5gXY100864丙烯酰胺溶液(干粉型)200mLXY100877甲叉雙丙烯酰胺25gXY100880四甲基乙二胺1.5mLXY100879過硫酸銨0.1g×10XY100873尿素100gXY100933MOPS(電泳級(jí))100gXY80935剝離硅烷50mLXY90308親和硅烷25mLXY90503電泳級(jí)甘油100mLXY100934電泳級(jí)二甲苯藍(lán)FF溶液10mLXY100882電泳級(jí)溴酚藍(lán)溶液10mLXY100948電泳級(jí)橙黃G溶液10mLXY130965PAGE膠長加樣槍頭1盒XY130966水飽和正丁醇10mLXY130967預(yù)混型丙烯酰胺-甲叉雙丙烯干粉(19:1)100gXY130968預(yù)混型丙烯酰胺-甲叉雙丙烯干粉(29:1)100g
核酸擴(kuò)增(PCR)

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