 |
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||
| [發(fā)表評論] [本類其他產品] [本類其他供應商] [收藏] | ||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 銷售商： 上海信裕生物工程有限公司 | 查看該公司所有產品 >> |
Protein G瓊脂糖產品及特點
Protein G均能特異性地與抗體的Fc區(qū)結合，廣泛應用于抗體純化、免疫化學等領域，其操作流程如下：
本產品以瓊脂糖凝膠為基質，Protein G共價交聯到4% Agarose beads。本產品具有下列特點：
1. 適用于用于免疫沉(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)，也可以用于抗體的純化。
2. 適用于免疫沉淀多數哺乳動物的IgG Fc段結合（包括：人、山羊、綿羊、兔、豚鼠、馬、豬、猴、小鼠、大鼠等），不與狗IgG結合、不結合人IgM、IgD、和IgA。
3. 物理化學性質穩(wěn)定，配基不易脫落，使用壽命長，使用方便。
注意事項
1. 請勿冷凍保存本產品。
2. 使用前一定要充分重懸，即充分顛倒若干次使混合均勻。
3. 從蛋白樣品收集開始，所有步驟中蛋白樣品都必須在4℃或冰上操作。
4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
備忘錄
Protein G
Protein G是一種從G型鏈球菌屬分離得到的細胞壁蛋白，主要通過Fc片段與哺乳動物IgGs結合。天然Protein G有3個IgG結合域，同時也具有白蛋白和細胞表面結合域。重組Protein G去除了白蛋白和細胞表面結合域，以減少非特異性結合。Protein G可用于純化不能與Protein A很好結合的哺乳動物單抗和多抗IgG的純化。相對于Protein A，Protein G對于大多數哺乳動物的IgG有著更高的親和力，尤其是對IgG的亞基，如人 IgG3，小鼠IgG1和鼠 IgG2a。與Protein A不同，Protein G不結合人IgM，IgD，或IgA。
Protein G瓊脂糖細菌的培養(yǎng)和收集：
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數生長后期。
Protein G瓊脂糖質粒DNA少量快速提取：
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
Protein G瓊脂糖（一）、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。
2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY131119HRP 穩(wěn)定劑/ 稀釋劑200mLXY130565β-Actin小鼠單抗30μLXY130566α-Actin小鼠單抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠單抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠單抗30μLXY130569GAPDH小鼠單抗30μLXY130570植物Actin小鼠單抗30μLXY130571組蛋白3.1小鼠單抗30μLXY130572COX IV兔單抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),堿性磷酸酶標記100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc)，堿性磷酸酶標記100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L)，堿性磷酸酶標記100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L)，堿性磷酸酶標記100μLXY131148驢抗山羊IgG，堿性磷酸酶標記60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記300μLXY131152兔抗雞IgY，辣根過氧化物酶標記300μLXY131153驢抗山羊IgG，辣根過氧化物酶標記60μLXY131154山羊抗小鼠IgG，熒光素488標記0.1mg
