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苯基介質(zhì)產(chǎn)品及特點(diǎn)本產(chǎn)品為疏水性較強(qiáng)的苯基瓊脂糖疏水層析介質(zhì),以6%交聯(lián)瓊脂糖膠為基質(zhì),以疏水型強(qiáng)的Phenyl為配基。理化性質(zhì)穩(wěn)定。
常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。
苯基介質(zhì)細(xì)菌的培養(yǎng)和收集:
將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長后期。
苯基介質(zhì)質(zhì)粒DNA少量快速提取:
質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速,能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
苯基介質(zhì)(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。
8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。
XY130531組織培養(yǎng)專用蛋白酶抑制劑1mLXY130543α2巨球蛋白25Inh.UXY130544AEBSF溶液5mLXY130534抗凝血酶Ⅲ溶液1mLXY130535APMSF溶液1mLXY100834胰蛋白酶抑制劑溶液10mLXY130536抑氨肽酶溶液5mLXY130537鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液10mLXY100538鈣蛋白酶抑制劑Ⅱ溶液10mLXY100539胰凝乳蛋白酶抑制劑溶液1mLXY130540二氯異香豆素溶液10mLXY130541E-64蛋白酶抑制劑溶液10mLXY100837EDTA溶液,0.5M,蛋白級(jí)10mLXY130532EGTA溶液10mLXY130542水蛭素溶液2000ATUXY100836亮抑蛋白酶肽溶液1mLXY130533木瓜蛋白酶抑制劑溶液10mLXY100835胃蛋白酶抑制劑溶液1mLXY130545膦酰二肽溶液10mLXY100833PMSF溶液5mLXY131043CHAPS5gXY131044辛甲基β 葡糖苷1gXY131045辛甲基硫吡喃葡萄糖苷5gXY131046n-十二烷基-β-D-麥芽糖苷1gXY131047脫氧膽酸鈉5gXY131048膽酸鈉5gXY131049十二烷基磺酸鈉100g