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小鼠抗MBP標簽單抗產品及特點
MBP(麥芽糖結合蛋白)標簽分子量大小約40KD,由大腸桿菌K12的malE基因編碼。MBP可以增加在細菌中過量表達的融合蛋白尤其是真核蛋白的溶解性,在細菌中表達時,MBP標簽可以融合在蛋白的N端或C端。本產品可用于檢測各種系統表達的MBP標簽重組蛋白。本抗體具有下列特點:
克隆號: 6D3
抗體類型: Mouse IgG1
免疫原:全長MBP蛋白
應 用: WB
建議濃度:1:1000~1:10000
低溫運輸,-20℃保存,有效期兩年。
小鼠抗MBP標簽單抗細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
小鼠抗MBP標簽單抗質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
小鼠抗MBP標簽單抗(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
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