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RIPA裂解液(弱)產品及特點
RIPA(Radio ImmunoprecipitationAssay)裂解液是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規的Western、IP等實驗。本產品裂解能力強度溫和,對膜蛋白的處理能力一般;對核蛋白的提取能力較好;對胞漿蛋白、胞漿磷酸化蛋白和各種轉錄因子處理效果很好。本產品含有各種蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制劑,能有效防止各種蛋白酶對目的蛋白的降解。
低溫運輸,4℃保存,有效期一年。
RIPA裂解液(弱)細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
RIPA裂解液(弱)質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
RIPA裂解液(弱)(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY60105加A試劑盒50次XY60106加T試劑盒50次XY60107DNA粘轉平試劑盒20次XY130813DNA磷酸化試劑盒20次XY130828DNA去磷酸化試劑盒20次XY4610G載體2μgXY51104B載體2μgXY60603即用型藍白T載體A型(T7-SP6,有MCS)20次XY120512即用型藍白T載體B型(T7-T3,有MCS)20次XY120513即用型藍白T載體C型(T7-T3,無MCS)20次XY120514即用型藍白T載體D型(無啟動子,有MCS)20次XY120515即用型藍白T載體E型(無啟動子,無MCS)20次XY60803可保種型藍白T載體50ngXY131233零背景T載體20次XY60908質粒(載體)系列產品2μgXY120402PCR專用LIC克隆套裝1ugXY130859M13mp18 DNA10μg(A)|10μg(B)XY90407Lambda DNA5μg(A)|250μg(B)|250μg(C)XY130860φX174 RFⅠDNA30μgXY130861φX174RF Ⅱ DNA30μgXY130987接頭DNA5nmol(A)|5nmol(B)|5nmol(C)|5nmol(D)|5nmol(E)XY130988EcoR I-Not I-BamH I接頭1nmolXY130204Oligo快速復性液,10×1mLXY100103裂殖酵母化學感受態細胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81109酵母化學感受態細胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81201酵母電轉感受態細胞制備試劑盒20次