動物細胞裂解液產品及特點
本產品含有多種細胞裂解成分和蛋白酶抑制成分,可以在非變性或變性條件下迅速裂解組織或培養細胞,使之釋放出細胞內蛋白,用于后續實驗。它具有以下優點:
1. 快速裂解,多種裂解成分經過精心優化,能快速使細胞裂解。
2. 非變性(80807A)產品能最大程度地保留蛋白天然結構和功能,適用于Western Blot、免疫沉淀、免疫共沉淀、蛋白活性檢測(信號傳遞研究和酶動力學檢測)等各種研究。
3. 變性(80807B)裂解細胞的效率更高,適用于Western Blotting和對抗原空間構型不敏感的免疫共沉淀研究。
4. 適用于培養細胞(包括懸浮細胞)和新鮮組織。
使用及效果
按每50 mg組織(預先需要勻漿)或每2×106個細胞加入0.2 mL裂解液的比例將樣品和裂解液混合,吹打混勻,放置冰上并每隔5~6分鐘振蕩器輕柔振蕩一次,共4次。4℃ 10000 g離心3分鐘,取上清放-80℃凍存或直接使用。
動物細胞裂解液細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
動物細胞裂解液質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
動物細胞裂解液(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY13122710 nt隨機引物5μgXY1206796nt隨機引物(抗水解)100μLXY80206兩管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY91202雙酶一管式RT-PCR試劑盒(MMLV-Taq)50次XY130609一步式RT-PCR Mix1mLXY130957免RNA提取RT-PCR試劑盒100次XY101219即用型熒光定量RT-PCR試劑盒50次XY100941通用型全基因組擴增試劑盒30次XY100938單細胞全基因組擴增試劑盒30次XY100940石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒30次XY100942單孢子全基因組擴增試劑盒30次XY100947環狀DNA全基因組擴增試劑盒30次XY100203通用型LAMP試劑盒50次XY101114通用型RT-LAMP試劑盒50次XY130923LAMP擴增陽性對照50次XY130833LAMP可見光染料1mLXY131179核酸稀釋液,測OD專用100mLXY131083Ribo-SPIA cDNA 擴增試劑盒20次XY91106T7體外轉錄試劑盒50次(A)|50次(B)