鹽酸四環(huán)素干粉產(chǎn)品及特點

鹽酸四環(huán)素分子式為C22H24N2O8·HCl，分子量為480.91。黃色結(jié)晶，無氣味。味苦。易吸濕。遇光色漸變深。易溶于水，溶于甲醇、乙醇，不溶于羥類。它是從放線菌金色鏈叢菌（Streptomycesaureofaciens ）的培養(yǎng)液中分離出來的抗菌物質(zhì)，對革蘭氏陽性菌、陰性菌、立克次體、濾過性病毒、螺旋體屬乃至原蟲類都有很好的抑制作用，對結(jié)核菌、變形菌等則無效。

低溫運輸、4℃干燥避光保存，有效期一年。

鎂離子是四環(huán)素的拮抗劑，四環(huán)素抗性菌的篩選應(yīng)使用不含鎂鹽的培養(yǎng)基（如LB培養(yǎng)基）。

鹽酸四環(huán)素干粉細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

鹽酸四環(huán)素干粉質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　鹽酸四環(huán)素干粉（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY130840硫酸鎂溶液，10mM，PCR級5mLXY130841石蠟油，PCR級10mLXY80205DMSO，PCR級1.5mLXY130506海藻糖溶液，1.5M，PCR級1.5mLXY70902甜菜堿溶液，5M，PCR級1.5mLXY70909綠如藍(lán)染料，PCR級0.1mL|1mLXY51208dNTP溶液，10 mM0.5mL(B)|5mL(B)XY131038dUTP溶液，100 mM0.4mLXY130920dITP溶液，100mM0.5mLXY120615dATP溶液，100mM0.5mLXY120617dTTP溶液，100mM0.5mLXY120619dGTP溶液，100mM0.5mLXY130917dCTP溶液，100mM0.5mLXY131139Deaza dGTP溶液，5mM0.4mLXY131140雙脫氧dNTP溶液，10mM40uL×4XY131141dNTP和引物清除劑100次XY131212PCR Mix染料10mLXY60901可逆型Taq DNA聚合酶抑制劑0.3mLXY130815Taq酶抗體250U|1000UXY130601DNA 修復(fù)混合液30次|150次XY70802即用型PCR試劑盒2.0100次|600次

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