自誘導(dǎo)培養(yǎng)基產(chǎn)品及特點

本產(chǎn)品是在pET專用生長培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上開發(fā)而成的，它利用E.coli 自身對培養(yǎng)基中碳源和能源的調(diào)控利用機制，實現(xiàn)外源蛋白在細菌達到飽和期后的自動誘發(fā)。

具有下列特點：

1. 不需添加任何IPTG或相關(guān)誘導(dǎo)物，節(jié)約成本。

2. 免去了密切監(jiān)控菌液密度的過程，尤其適合大規(guī)模篩選 。

3. 細菌生長密度遠高于IPTG誘導(dǎo)表達系統(tǒng) 。

4. 外源蛋白表達量遠遠高于IPTG誘導(dǎo)表達系統(tǒng)。

5. 本產(chǎn)品即開即用，操作簡單 。

6. 與各種細胞培養(yǎng)容器兼容（如培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)罐、深孔管、發(fā)酵罐等）。

使用及效果

用本產(chǎn)品以及LB+IPTG誘導(dǎo)培養(yǎng)細菌獲得的外源蛋白表達量比較

自誘導(dǎo)培養(yǎng)基細菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

自誘導(dǎo)培養(yǎng)基質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　自誘導(dǎo)培養(yǎng)基（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

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