X33酵母菌種產(chǎn)品及特點

X-33是畢赤酵母菌株，屬于真核細胞。具有氨芐和卡納抗性。質(zhì)粒轉(zhuǎn)化的條件為電轉(zhuǎn)化，應(yīng)用于蛋白表達。適宜生長溫度是28至30度，溫度超過32度對蛋白的表達是有害的，并可能導致細胞的死亡。可生長在YPD培養(yǎng)基中。用來表達含有Zeocin抗性的載體重組質(zhì)粒。含有AOX1基因，產(chǎn)生的轉(zhuǎn)化株是Mut+基因型。

其基因型為：

野生型

低溫運輸，-80℃保存，有效期一年。

X33酵母菌種細菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

X33酵母菌種質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　X33酵母菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY81104超快核酸銀染試劑盒1000mLXY100808溴化乙錠干粉1gXY3180溴化乙錠溶液1.5mLXY3092溴化乙錠清除劑100次XY70503DNA電泳分子量標準50次XY111107DNA電泳分子量標準(2)50次XY90602DNA電泳分子量標準(3)50次XY120654Southern專用DNA Marker20次(A)|20次(B)XY90101大片段DNA分子量標準50μgXY130960超螺旋DNA分子量標準100uLXY70605miRNA電泳分子量標準30次XY3120微量RNA助沉劑0.1mLXY131187Acryl DNA助沉劑1mLXY131188彩色Acryl DNA助沉劑1gXY131189分子生物學級糖原干粉1gXY131190分子生物學級糖原溶液1mLXY50903微量核酸沉淀劑10mLXY60402超快非醇核酸沉淀劑30次|100次XY110801核酸濃縮劑30mLXY80204柱式RNA純化試劑盒50次XY90211低載量PCR片段純化試劑盒50次|100次

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