Top10F’菌種產(chǎn)品及特點

TOP10F菌株帶lacIq，需加IPTG誘導(dǎo)表達克隆于lac啟動子后的外源基因，用于藍白斑篩選時，需加入IPTG和 X-Gal。

其基因型如下：

F´ {lac Iq Tn10 (TetR)} mcr A Δ(mrr -h s d R M S -m c r B C ) Φ 8 0l a c Z Δ M 1 5Δlac X74 rec A1 ara D139 Δ(ara -leu)7697 gal U gal K rps L end A1 nup G

低溫運輸，-80℃保存，有效期一年。

Top10F’菌種細菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

Top10F’菌種質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　Top10F’菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY1101    細菌基因組DNA快速提取試劑盒    50次/100次/200次
XY1201    細菌基因組DNA提取試劑盒(溶液型)    50次/100次/200次
XY1301    中量/大量細菌基因組DNA提取試劑盒    20次/50次
XY4101    真菌基因組DNA快速提取試劑盒    50次/100次/200次
XY1401    植物基因組DNA快速提取試劑盒    50次/100次/200次
XY1404    大量植物基因組DNA快速提取試劑盒    10次
XY1501    新型植物基因組DNA快速提取試劑盒    50次/100次/200次
XY3801    新型大量植物DNA快速提取試劑盒    10次
XY2001    酵母基因組DNA快速提取試劑盒(離心柱型)    50次
XY2801    酵母基因組DNA提取試劑盒(溶液型)    50次/100次
XY2901    中量/大量酵母基因組DNA提取試劑盒(溶液型)    10次
XY1601    凋亡DNA Ladder快速提取試劑盒    20次/50次

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