Rosetta-gami B(DE3)菌種產品及特點

Rosetta-gami B(DE3)系列菌株來源于Origami B系列菌株，攜帶有TrxB和Gor基因突變，集合了BL21系列，Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的優點，極大的增強了細胞內二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真核細胞蛋白的表達能力。

Rosetta-gami B(DE3)系列菌株含有p R A R E 質粒， 包含稀有密碼子； 含有BL21系列菌株中的lacZY基因突變，能夠通過IPTG高效控制目的基因的表達；含有溶源性的 λDE3，帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。

其基因型如下：

F– ompT hsdS B(rB–mB–) gal dcm lacY1aphC (DE3) gor522 ::Tn10 trxB pRARE(CamR, KanR, TetR)

低溫運輸，-80℃保存，有效期一年。

Rosetta-gami B(DE3)菌種細菌的培養和收集：

將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。

Rosetta-gami B(DE3)菌種質粒DNA少量快速提取：

質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　Rosetta-gami B(DE3)菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY83674    一管式病毒DNAOUT    50次|200次
DNA純化
XY83660    非凍型組織DNA保存液    100mL|250mL
XY860910    非凍型血液DNA保存液    100mL|250mL
XY890315    非凍型尿液DNA保存液    15mL|100mL
XY880802    非凍型拭子DNA保存液    100mL(A)|100mL(B)
XY8130924    口腔采樣拭子    50支
XY8130925    鼻腔采樣拭子    50支
XY8130926    DNA樣品采集拭子    50支
XY8130927    宮頸采樣拭子    50支(A)|50支(B)
XY870603    土壤腐殖酸清除劑    100mL
XY870302    一步離心式石蠟清除劑    100次
XY890901    菌體內毒素清除劑    200mL
XY860403    紅細胞裂解液A型(核酸純化)    100mL
XY890309    紅細胞裂解液B型(流式細胞分析用)    100mL

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