Origami(DE3)菌種產品及特點

Origami系列菌株是K-12細胞的衍生菌，在trxB和gor基因上同時含有突變，這使得該菌株能夠更加高效的在細胞質內生成二硫鍵，有助于含二硫鍵蛋白的活性蛋白形成。Origami系列菌株的感受態細胞能夠用于氨芐抗性質粒的蛋白表達，尤其是和pET32a載體能夠完美搭配使用。pET32a載體含有thioredoxin (TRX)融合標簽，能夠高效提升胞質內蛋白二硫鍵的形成。

DE3是溶源性的λDE3，在lacUV5啟動子下攜帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。該菌株適用于pET系列載體及其他T7啟動子系列載體。該菌株具有卡那霉素和四環素抗性。

其基因型如下：

Δ(ara –leu )7697 Δlac X74 Δpho A Pvu IIpho R ara D139 ahp C gal E gal K rps LF[lac +lac Iq pro ] (DE3) gor 522::Tn10gor B (KanR, TetR)

低溫運輸，-80℃保存，有效期一年。

Origami(DE3)菌種細菌的培養和收集：

將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。

Origami(DE3)菌種質粒DNA少量快速提取：

質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　Origami(DE3)菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY042    風疹病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒    48
XY043    新布尼亞病毒核酸熒光PCR檢測試劑盒    48
XY044    麻疹病毒/風疹病毒核酸熒光PCR試劑盒    48
XY045    東部/西部/委內瑞拉馬腦炎病毒核酸三色熒光PCR檢測試劑盒    48
XY046    登革熱Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ病毒核酸四色熒光PCR檢測試劑盒    48
XY047    小反芻獸疫病毒熒光PCR檢測試劑盒    48
編號    名稱    規格
XY001    腦膜炎奈瑟菌核酸熒光PCR檢測試劑盒    48
XY002    豬鏈球菌核酸熒光PCR檢測試劑盒    48
XY003    產單核李斯特菌核酸熒光PCR檢測試劑盒    48
XY004    豬鏈球菌/腦膜炎奈瑟菌雙色核酸熒光PCR檢測試劑盒    48
XY021    阪崎腸桿菌熒PCR試劑盒    40次/盒
XY022    沙門氏菌屬熒PCR檢測試劑盒    40次/盒
XY023    志賀氏菌PCR試劑盒    40次/盒
XY024    單增李斯特氏PCR試劑盒    40次/盒

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