BL21-CodonPlus-RIL菌種產(chǎn)品及特點(diǎn)

BL21-CodonPlu系列菌株有助于解決密碼子偏倚性問(wèn)題，細(xì)胞中帶有大腸桿菌稀有tRNA的額外基因拷貝，從而可以高水平表達(dá)許多在常規(guī)大腸桿菌宿主中難以表達(dá)或不能表達(dá)的蛋白。

BL21-CodonPlus–RIL細(xì)胞帶有額外拷貝的argU、ileY和leuW tRNA基因，解決了表達(dá)富含AT的基因組蛋白密碼子偏倚性

問(wèn)題。

其基因型如下：

F- omp T hsd S（rB-mB-）dcm + Tetr galend A Hte [argU ile Y leu W Camr]

低溫運(yùn)輸，-80℃保存，有效期一年。

BL21-CodonPlus-RIL菌種細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無(wú)菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期。

BL21-CodonPlus-RIL菌種質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　BL21-CodonPlus-RIL菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無(wú)菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY70606一站式miRNA尿素-PAGE電泳套裝30次XY100205一站式DNA非變性PAGE電泳套裝30次XY51210超快核酸電泳液干粉20L|50LXY100211TAE電泳液，50×250mL|2500mLXY90313TBE電泳液，10×250mL|2500mLXY100816堿性膠電泳液，10×250mLXY3150RNA電泳液，10×100mL|250mLXY3690DNA上樣液，6×10mL(A)|10mL(B)XY3130三合一RNA上樣液1.5mL(A)|1.5mL(B)XY101222DNA堿性膠上樣液1.5mL|10mLXY70608miRNA尿素-PAGE上樣液1.5mL|10mLXY100874DNA尿素-PAGE上樣液1.5mL|10mLXY100875DNA 非變性PAGE上樣液1.5mL|10mLXY3280SYBR GreenⅠ，電泳級(jí)50μLXY61201耐熱型SYBR染料，電泳級(jí)50μLXY70303綠如藍(lán)核酸染料(UV型)0.5mL|1.5mLXY121002綠如藍(lán)核酸染料(可見(jiàn)光型)10mLXY81104超快核酸銀染試劑盒1000mLXY100808溴化乙錠干粉1gXY3180溴化乙錠溶液1.5mLXY3092溴化乙錠清除劑100次XY70503DNA電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)50次

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