BJ5183菌種產(chǎn)品及特點

BJ5183是高效重組E.coli菌株，是一種常用的腺病毒重組菌株。該宿主菌能夠?qū)⒑�有同源序列的兩個質(zhì)粒，一個是含有目的基因的轉(zhuǎn)移載體，另一個是含有腺病毒基因組的腺病毒載體，通過菌株中含有的重組組件和兩個質(zhì)粒上的同源序列，將這兩個質(zhì)粒進(jìn)行重組。

其基因型如下：

end A1 sbc BC rec BC gal K met thi -1 bio Thsd R （Strr）

低溫運(yùn)輸，-80℃保存，有效期一年。

BJ5183菌種細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

BJ5183菌種質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　BJ5183菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY1306249°N DNA 連接酶2500UXY120421T4 RNA連接酶1000UXY130622T4 RNA連接酶 11000UXY130855T4 RNA 連接酶 2 (雙鏈RNA連接酶 )150UXY130856T4 RNA 連接酶 2(截短型 )2000UXY130857T4 RNA 連接酶 2 (截短型 K227Q)2000UXY120510ATP依賴的Dnase200UXY131230DNase I干粉100mgXY130984DNase I溶液1.5mLXY90205RNase A干粉100mg|500mgXY3160RNase A溶液1.5mLXY120409BAL 31核酸酶50UXY101001Benzonase核酸酶500UXY130824冷啟動核酸酶10000UXY120407S1核酸酶5000UXY120408綠豆核酸酶1000UXY120412微球菌核酸酶5000UXY120413核糖核酸酶H600UXY130675核糖核酸酶HII250UXY130637Tma 核酸內(nèi)切酶 III500UXY130638核酸內(nèi)切酶 IV1000UXY131228Tth 核酸內(nèi)切酶 IV500UXY130640核酸內(nèi)切酶 V250UXY130639核酸內(nèi)切酶 III(Nth)1000UXY130642核酸內(nèi)切酶 VIII1000UXY130635T7核酸內(nèi)切酶 I250U

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