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HLEC人淋巴內皮細胞
英文名稱:HLEC總訪問:535
國產/進口:進口半年訪問:39
產地/品牌:美國/ATCC產品類別:細胞株/菌種
規       格:HLEC 最后更新:2025-3-19
貨       號:AC338560
參考報價:1600
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HLEC人淋巴內皮細胞密度達到傳代密度且細胞活性在90%以上時,可以凍存細胞,在超凈臺中將要凍存的細胞移入離心管,1000rpm離心5min,棄上清,用90%培養液+10%DMSO的混合液重懸細胞,并調整細胞密度為4-6×106/ml,將細胞懸液分裝到凍存管中(1-1.5ml/管)。

含量:>1x106 個/mL,  規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

培養基:85%RPMI-1640+15%FBS

生長特性:貼壁生長

污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

HLEC人淋巴內皮細胞傳代操作步驟:

一、貼壁細胞傳代

1.提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內。

2.吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞。

3.加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用。

4.HLEC人淋巴內皮細胞用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡。

5.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。

二、懸浮細胞傳代

1.將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min。

2.棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液。

3.將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

HLEC人淋巴內皮細胞 培養的過程中,經常見到黑色的顆粒或小黑點,這種情況是怎么引起的呢?該怎么避免呢?原因:

黑點,大概有細胞本身帶的,環境有的,還有人身上帶進細胞間的,還有就是血清和培養基

1、如果小黑點有增殖趨勢,那么就有可能是污染了,需要處理;

2、如果小黑點沒有增殖趨勢,且不影響細胞生長,也不影響實驗的話,則可能

 a、是“黑膠蟲”,黑膠蟲究竟是一種生物還是非生物,本身就存在爭議。有人認為是從血清中來的一種原蟲,也有人認為是細菌,或是真菌,也有人認為是血清中的蛋白的結晶。“黑膠蟲”可寄生于動物細胞,也可以生存于培養基中,依靠HLEC人淋巴內皮細胞和培養基中的營養為生,并隨細胞傳代而傳代。“黑膠蟲”與細胞競爭性生長,開始時對細胞并沒有什么影響,但當黑膠蟲的數量多到一定程度的時候, 細胞生長就會受到影響直至死亡,嚴重影響了科研活動的開展和進行。以前(這個至少是10年以前),很多實驗室在養細胞時用國產血清,那時的血清可能質量不過關,有所謂的“黑膠蟲”,但是也沒有明確的鑒定。但是現在的血清,即使國產的,產品里這種現象就少見了。

 b、是細胞碎片,或血清里德沉淀析出,在做布朗運動。

 c、是核糖體,也可能是雜質ZYC4142     體外管腔形成分析試劑盒    IVTFA    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4143        細胞粘附試劑盒    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4144     I型膠原細胞粘附檢測試劑盒      Col    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4145    纖維粘連細胞粘附檢測試劑盒     Fibro    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4146     膠原I-3D凝膠試劑盒    C3DGK    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4147     膠原I-細胞培養表面包被試劑盒    CCCSCK    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4148        細胞活力與凋亡檢測試劑盒    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4149    MTT細胞活力和增殖檢測試劑盒     MTT    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 
ZYC4150    WST-1細胞活力和增殖檢測試劑盒     WST    形態:貼壁,懸浮均有;上皮細胞樣    培養條件:MEM/F12 +10% FBS 

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