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HT-29人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞特性：
1） 來源：HT-29人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞
2） 含量：>1x106 個(gè)/mL
3） 污染：支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5）培養(yǎng)基：RPMI1640(w/oHepes)15%NBS
6）生長特性：貼壁生長
運(yùn)輸和保存：使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺(tái)棄去上清，加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途：僅供科研使用。
HT-29人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備基礎(chǔ)培養(yǎng)基( GIBCO，，添加NaHCO3 1.5g/L，丙酮酸鈉 0.11g/L)；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） HT-29人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
HT-29人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
2.先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置數(shù)小時(shí)（4h左右），穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)，切忌在溫箱內(nèi)靜置過夜。
3.靜置后鏡檢，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)。建議傳代后也拍照記錄細(xì)胞生長情況。
4. 懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞瓶內(nèi)液體都轉(zhuǎn)移至無菌離心管內(nèi)，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心5min，培養(yǎng)基上清可備用，管底細(xì)胞沉淀用培養(yǎng)基重懸。鏡檢時(shí)若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)培養(yǎng)；若密度未超過80%，細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，待達(dá)到80%時(shí)再正常傳代。備注：聚團(tuán)生長慢，有密度依賴，必須使用T25培養(yǎng)瓶豎立培養(yǎng)，3天一次半量換液一次，1-2周傳代一次。
貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，收集細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，留8ml繼續(xù)培養(yǎng)至80%左右再傳代，瓶蓋可稍微擰松。備注：細(xì)胞貼壁慢，傳代后細(xì)胞放2天不動(dòng)。
5.細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基含血清和雙抗，可收集后4℃保存?zhèn)溆茫裳a(bǔ)加2%血清。剛開始傳代時(shí)建議一半用細(xì)胞瓶內(nèi)的培養(yǎng)基，一半用客戶自備的培養(yǎng)基，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件，以免因不適應(yīng)而造成生長狀態(tài)不佳。
6.因?yàn)?strong>HT-29人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞培養(yǎng)過程外因太多，所以我們的售后保障期為一周，超過一周的細(xì)胞我們會(huì)酌情處理，但不提供免費(fèi)更換服務(wù)。ZYC3807 小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基 TMCM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3808 滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基 TM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3809 脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 AdM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3810 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 PAM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3811 脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基 PADM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3812 間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 MSCM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3813 間充質(zhì)干細(xì)胞-成骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基 MODM-500 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3814 MODM-250 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3815 間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基 MADM-500 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3816 MADM-250 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
ZYC3817 間充質(zhì)干細(xì)胞-軟骨分化培養(yǎng)基 MCDM 形態(tài)：貼壁，懸浮均有；上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)條件：MEM/F12 +10% FBS
