細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

小鼠生長因子(mouse GH)ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝
大鼠雌二醇(rat E2)ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝
土壤無機磷（S-PHOS）含量測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
白介素 -21(IL-21)ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝
干擾素 - a (IFN- a )ELISA 規格：96T法國 Diaclone
大鼠腎損傷分子(rat Kim-1)ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝
谷氨酰胺酶（GLS)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
白介素 -12 p70(IL-12 p70)ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝
小鼠血小板源生長因子-BB(mouse PDGF-BB)ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝
大鼠可溶性CD4分子(rat sCD4)ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝
褪黑素 CAS 73-31-4 規格： 20mg 訂購|咨詢
十六酸 CAS 21096 規格： HPLC≥98%；20mg/vial 訂購|咨詢
鉤藤堿; Rhynchophylline CAS 76-66-4 規格： 20mg 訂購|咨詢
甲基當藥寧 CAS 22172-17-4 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
相思;L-Abrine CAS 21339-55-9 規格： 20mg 訂購|咨詢
雜交瘤（B類）；Z51B3C10H12A12G2F7B5培養啡因 CAS 21399 規格： 20mg 訂購|咨詢
α-菠甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷 CAS  規格： 5mg 訂購|咨詢
7－羥基馬兜鈴酸A CAS 79185-75-4 規格： 10mg 訂購|咨詢
秋水仙苷 CAS 602-41-5 規格： 20mg 訂購|咨詢
泛酸鈉 CAS  規格： 100mg 訂購|咨詢
粘委陵菜 CAS  規格： 1g 訂購|咨詢
異黃芪皂苷II CAS 86764-11-6 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。