細(xì)胞名稱 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤；SH-SY5Y說明書
形態(tài)特性 上皮樣細(xì)胞
生長特性 貼壁懸浮混合生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于1970年建立的一神經(jīng)母細(xì)胞瘤患者的轉(zhuǎn)移骨瘤灶細(xì)胞SK-N-SH經(jīng)三次克隆后的亞系(SK-N-SH→SH-SY→SH-SY5→SH-SY5Y)。 該細(xì)胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 SH-SY5Y細(xì)胞的生長密度可高達(dá)1X106細(xì)胞/cm2，生長成懸浮和貼壁混合生長，有的聚集成細(xì)胞叢
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN8
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR Amelogenin：X；CSF1PO:11；D13S317:11；D16S539:8,13；D18S51:13,16；D19S433:13,14；D21S11:31,31.2；D2S1338:17,19；D3S1358:15,16；D5S818:7,12；D7S820:7,10；D8S1179:10,15；FGA:23.2,24；TH01:7,10；THOX:8,11；vWA:14,18；
同工酶 無
染色體 46-48

運(yùn)輸和保存：

人神經(jīng)母細(xì)胞瘤；SH-SY5Y說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）人神經(jīng)母細(xì)胞瘤；SH-SY5Y說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人神經(jīng)母細(xì)胞瘤；SH-SY5Y說明書客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

AMPD3  紅細(xì)胞腺苷脫氨酶3抗體 0.2ml
Thymidylate synthase/TS  胸苷酸合成酶抗體 0.1ml
IL-28B/IL-28C  白細(xì)胞介素28B抗體 0.2ml
LGI1/ETL1  富含亮氨酸膠質(zhì)瘤失活蛋白1抗體 0.1ml
Cystatin E/M  半胱氨酸蛋白酶抑制劑6抗體 0.1ml
phospho-Tau protein(Ser356)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
CDK11  周期素依賴性激酶11抗體 0.2ml
Musashi 1/Msi1  神經(jīng)干細(xì)胞RNA結(jié)合蛋白Musashi1抗體 0.2ml
Histone H3 (tri methyl K36)   三甲基化組蛋白H3抗體 0.1ml
IL-17  白介素-17抗體 0.1ml
PSF2  PSF2蛋白抗體 0.2ml
D-松醇 CAS 10284-63-6 規(guī)格： ≥95;20mg 訂購|咨詢
重樓皂苷II CAS 76296-72-5 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
磺胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 68-35-9 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢
次黃嘌呤 CAS 68-94-0 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤；SH-SY5Y說明書夏佛塔苷 CAS 51938-32-0 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
毛兩面針?biāo)?CAS 483-90-9 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
銹胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 55814-41-0 規(guī)格： 0.1g 訂購|咨詢
一縮二丙二醇 CAS  規(guī)格： 1ml 訂購|咨詢
毛蕊異黃苷;Calycosin-7-O CAS 20633-67-4 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
叔丁基對;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品-TBHQ CAS 1948-33-0 規(guī)格： 0.25g 訂購|咨詢
10-(P) 10-去乙酰基紫杉醇 CAS  規(guī)格： 5mg 訂購|咨詢
氫東莨菪堿; 東莨菪堿氫鹽 CAS 114-49-8 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢