
細(xì)胞名稱
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H524培養(yǎng)
形態(tài)特性 圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細(xì)胞1982年建系,源自非小細(xì)胞肺癌男性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
傳代方法
傳代情況 P21
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:12;D13S317:12;D16S539:12;D18S51:12,13;D19S433:16;D21S11:29,30;D2S1338:16,17;D3S1358:15;D5S818:12;D7S820:11,12;D8S1179:13,15;FGA:21,22,25;TH01:8,9.3;TPOX:8,10;vWA:14,17;
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H524培養(yǎng)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H524培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H524培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

ATAD5 染色體脆弱性相關(guān)基因抗體 0.2ml
CACNA1G/Cav3.1 電壓依賴性鈣通道Cav3.1抗體 0.1ml
phospho-PIK3R1(Tyr556) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgM/AP 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗馬IgM 0.1ml
Slc22a5 溶質(zhì)載體家族蛋白22成員5抗體 0.2ml
NEU4 神經(jīng)氨酸酶4抗體 0.2ml
Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32) 磷酸化叉頭蛋白家族抗體 0.1ml
FGF5 纖維母細(xì)胞生長因子5抗體 0.1ml
phospho-Crkl(Tyr244) 磷酸化接頭蛋白CrkL抗體 0.1ml
PNPO 磷酸吡哆醇氧化酶抗體 0.2ml
FGF18 成纖維細(xì)胞生長因子18抗體 0.2ml
脫水差向四環(huán)素 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 檢查
4-差向金霉素 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 檢查
β-多西環(huán)素 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 雜質(zhì)檢查
頭孢吩 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H524培養(yǎng)氨芐西林 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
頭孢氨芐 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
阿莫西林 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
頭孢酮S異構(gòu)體 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 檢查
新霉胺 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 檢查
醌式利福平 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 檢查