細(xì)胞名稱 人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1培養(yǎng)
形態(tài)特性 球形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞由Oettgen F及其同事從一名29歲的患有廣泛、快速進(jìn)展性惡性黑色素瘤的白人男性患者的胸導(dǎo)管中分離建立的。該細(xì)胞可產(chǎn)生黑色素，電鏡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞中色素顆粒與自身合成和吞噬作用相關(guān)。在63%的惡性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了針對(duì)該細(xì)胞系的抗體。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 維持細(xì)胞濃度在1×105~2×105,每周補(bǔ)液2~3次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12，13；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：13，16；D19S433：15，16.2；D21S11：29，32.2；D2S1338：19，23；D3S1358：14，16；D5S818：12，13；D7S820：12；D8S1179：16；FGA：18，20；TH01：6；TPOX：11；vWA：16，17；
同工酶
染色體 53~73，XY

運(yùn)輸和保存：

人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1培養(yǎng)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1培養(yǎng)細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1培養(yǎng)客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

LCEAH/ECHS1  長(zhǎng)鏈烯脂酰輔酶A水化酶抗體 0.1ml
NEK7  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Nek7抗體 0.2ml
MAOA  單氨氧化酶A抗體 0.1ml
STAT2  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 0.1ml
Mouse anti-human IgM ascites  小鼠抗人IgM腹水 1ml
CD38  CD38抗體 0.1ml
procollagen type IIA  Ⅱ型膠原α1抗體 0.2ml
ICOS/CD278  誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子CD278抗體 0.2ml
GIMAP6  GTP酶IMAP家族成員6抗體 0.2ml
Renalase  腎胺酶抗體 0.2ml
phospho-Tau protein(Ser404)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
山茱萸苷 英文名稱 cornin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
莫諾苷 英文名稱 morroniside  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
（R型）人參皂苷Rg2 英文名稱 Ginsenoside Rg2  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
商陸皂苷甲 英文名稱 esculentosideA  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
商陸皂苷丁 英文名稱 esculentosideD  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
商陸皂苷乙 英文名稱 esculentosideB  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
人皮膚黑色素瘤細(xì)胞；SK-MEL-1培養(yǎng)商陸皂苷丙 英文名稱 esculentosideC  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
牡荊素異鼠李糖苷 英文名稱 Rhamnosylvitexin  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
商陸皂苷戊 英文名稱 esculentosideE  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%
牡荊素鼠李糖苷 英文名稱 vitexin-2″-o-rhamnoside  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%