考馬斯亮藍(lán)G-250染液產(chǎn)品及特點(diǎn)

考馬斯亮藍(lán)G250是最經(jīng)典的SDS-PAGE染色方法，本產(chǎn)品就是基于此方法而開發(fā)的產(chǎn)品。它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，不需要自己?jiǎn)为?dú)準(zhǔn)備所有溶液。

2. 不需昂貴儀器，肉眼即可觀察結(jié)果，不象其他納克級(jí)的染色方法需要貴重的儀器設(shè)備（如SYPRO系列的高靈敏度的熒光染料需要熒光成像系統(tǒng)）。

3. 與普通掃描儀等兼容，便于保存數(shù)據(jù)和后續(xù)處理。

4. 靈敏度略高于考馬斯亮藍(lán)R250染色液。

使用及效果

凝膠電泳停止后，切除濃縮膠， 轉(zhuǎn)移分離膠至染色容器中。倒入30-40 mL溶液A，1mm和1.5mm厚PAGE膠，搖床分別震蕩10-15分鐘和2-3小時(shí)。 棄掉溶液A，加入15-20 mL溶液B，1mm和1.5mm厚PAGE膠，搖床分別震蕩30-60分鐘和2-3小時(shí)。棄掉溶液B，加入30-40 mL10%的乙酸，緩慢搖動(dòng)，直到出現(xiàn)亮藍(lán)色的蛋白條帶。常規(guī)掃描或保存。

考馬斯亮藍(lán)G-250染液細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無(wú)菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期。

考馬斯亮藍(lán)G-250染液質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對(duì)于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　考馬斯亮藍(lán)G-250染液（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無(wú)菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY100818MDS 42rec A trf A菌種1mLXY100819MDS 42T7lac 菌種1mLXY70602DNA快速連接試劑盒30次|100次XY90801一站式TA克隆試劑盒20次(A)|20次(B)XY131126一站式平末端克隆試劑盒20次XY130827小RNA克隆試劑盒10次XY130681通用 miRNA 克隆接頭0.83nmolXY51101常態(tài)轉(zhuǎn)化液20次XY50901菌落PCR試劑盒2.050次XY100884IPTG干粉2.5gXY80909IPTG溶液1.5mLXY100885X-Gal干粉0.5gXY80910X-Gal溶液10mLXY70803免質(zhì)粒提取篩選試劑盒1000次XY60404超級(jí)培養(yǎng)基100mLXY100602干粉型LB培養(yǎng)基250gXY100820干粉型LB-Lennox培養(yǎng)基250gXY100821干粉型2×YT培養(yǎng)基250gXY100822干粉型SB培養(yǎng)基250gXY100813干粉型SOB培養(yǎng)基250gXY100823干粉型SOC培養(yǎng)基250gXY100825自誘導(dǎo)培養(yǎng)基(lac啟動(dòng)子)200mLXY100824干粉型TB培養(yǎng)基250gXY100826穿刺培養(yǎng)基10管XY100827菌種保存液10管(A)|10管(B)XY130895YPD液體培養(yǎng)基100mLXY130896YPG液體培養(yǎng)基100mLXY130897YPDG液體培養(yǎng)基100mLXY130898MAL指示劑培養(yǎng)基100mLXY130899GAL指示劑培養(yǎng)基100mL

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