蛋白膠中量回收試劑盒產(chǎn)品及特點

隨著蛋白質(zhì)技術(shù)的發(fā)展，有必要從凝膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、免疫印跡、氨基酸組分分析或末端序列測定等。本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的中量蛋白膠回收法，流程如下：

它具有下列特點：

1. 簡單，不需要復(fù)雜而昂貴的儀器（如電洗脫儀）。

2. 適用于水溶性蛋白和膜蛋白。

3. 處理量大，一次可處理1 g樣品。

4. 回收率一般在50-90%之間（跟蛋白質(zhì)大小，洗脫時間相關(guān)）。

5. 跟后續(xù)的實驗兼容，包括2-D電泳、質(zhì)譜測序等。

使用及效果

將膠塊轉(zhuǎn)移到塑料注射器中，注射到另一個塑料注射器中，反復(fù)重復(fù)5次，然后加入1 mL的溶液A，室溫放置5分鐘，離心后上清即為得到回收的蛋白質(zhì)。

蛋白膠中量回收試劑盒細菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

蛋白膠中量回收試劑盒質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　蛋白膠中量回收試劑盒（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY90407Lambda DNA5μg(A)|250μg(B)|250μg(C)XY130860φX174 RFⅠDNA30μgXY130861φX174RF Ⅱ DNA30μgXY130987接頭DNA5nmol(A)|5nmol(B)|5nmol(C)|5nmol(D)|5nmol(E)XY130988EcoR I-Not I-BamH I接頭1nmolXY130204Oligo快速復(fù)性液，10×1mLXY100103裂殖酵母化學(xué)感受態(tài)細胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81109酵母化學(xué)感受態(tài)細胞制備試劑盒20次(A)|20次(B)XY81201酵母電轉(zhuǎn)感受態(tài)細胞制備試劑盒20次XY100502高效E.coli感受態(tài)細胞制備試劑盒20次XY81024DH5α感受態(tài)細胞0.1mL×10XY81221HB101感受態(tài)細胞0.1mL×10XY90207JM109感受態(tài)細胞0.1mL×10XY90208SURE感受態(tài)細胞0.1mL×10XY80701TG1感受態(tài)細胞0.1mL×10XY80806Top10感受態(tài)細胞0.1mL×10XY90504XL1-Blue感受態(tài)細胞0.1mL×10

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