Protein G瓊脂糖產(chǎn)品及特點

Protein G均能特異性地與抗體的Fc區(qū)結(jié)合，廣泛應(yīng)用于抗體純化、免疫化學(xué)等領(lǐng)域，其操作流程如下：

本產(chǎn)品以瓊脂糖凝膠為基質(zhì)，Protein G共價交聯(lián)到4% Agarose beads。本產(chǎn)品具有下列特點：

1. 適用于用于免疫沉(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)，也可以用于抗體的純化。

2. 適用于免疫沉淀多數(shù)哺乳動物的IgG Fc段結(jié)合（包括：人、山羊、綿羊、兔、豚鼠、馬、豬、猴、小鼠、大鼠等），不與狗IgG結(jié)合、不結(jié)合人IgM、IgD、和IgA。

3. 物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，配基不易脫落，使用壽命長，使用方便。

注意事項

1. 請勿冷凍保存本產(chǎn)品。

2. 使用前一定要充分重懸，即充分顛倒若干次使混合均勻。

3. 從蛋白樣品收集開始，所有步驟中蛋白樣品都必須在4℃或冰上操作。

4. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

備忘錄

Protein G

Protein G是一種從G型鏈球菌屬分離得到的細胞壁蛋白，主要通過Fc片段與哺乳動物IgGs結(jié)合。天然Protein G有3個IgG結(jié)合域，同時也具有白蛋白和細胞表面結(jié)合域。重組Protein G去除了白蛋白和細胞表面結(jié)合域，以減少非特異性結(jié)合。Protein G可用于純化不能與Protein A很好結(jié)合的哺乳動物單抗和多抗IgG的純化。相對于Protein A，Protein G對于大多數(shù)哺乳動物的IgG有著更高的親和力，尤其是對IgG的亞基，如人 IgG3，小鼠IgG1和鼠 IgG2a。與Protein A不同，Protein G不結(jié)合人IgM，IgD，或IgA。

Protein G瓊脂糖細菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時至對數(shù)生長后期。

Protein G瓊脂糖質(zhì)粒DNA少量快速提取：

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速，能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　Protein G瓊脂糖（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。

　　8、取20ml進行電泳檢查。

XY131119HRP 穩(wěn)定劑/ 稀釋劑200mLXY130565β-Actin小鼠單抗30μLXY130566α-Actin小鼠單抗30μLXY130567β-Tubulin小鼠單抗30μLXY130568α-Tubulin小鼠單抗30μLXY130569GAPDH小鼠單抗30μLXY130570植物Actin小鼠單抗30μLXY130571組蛋白3.1小鼠單抗30μLXY130572COX IV兔單抗20μLXY131144山羊抗小鼠IgG(H+L),堿性磷酸酶標記100μLXY131145山羊抗兔IgG(Fc)，堿性磷酸酶標記100μLXY131146山羊抗人IgG(H+L)，堿性磷酸酶標記100μLXY131147山羊抗大鼠IgG(H+L)，堿性磷酸酶標記100μLXY131148驢抗山羊IgG，堿性磷酸酶標記60μLXY131149山羊抗兔IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記300μLXY131150山羊抗小鼠IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記300μLXY131151山羊抗人IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記300μLXY131152兔抗雞IgY，辣根過氧化物酶標記300μLXY131153驢抗山羊IgG，辣根過氧化物酶標記60μLXY131154山羊抗小鼠IgG，熒光素488標記0.1mg

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