Rosetta-gami B(DE3)菌種產(chǎn)品及特點(diǎn)

Rosetta-gami B(DE3)系列菌株來源于Origami B系列菌株，攜帶有TrxB和Gor基因突變，集合了BL21系列，Rosetta系列菌株和Origami系列菌株的優(yōu)點(diǎn)，極大的增強(qiáng)了細(xì)胞內(nèi)二硫鍵的形成和含有在大腸桿菌中稀有密碼子的真核細(xì)胞蛋白的表達(dá)能力。

Rosetta-gami B(DE3)系列菌株含有p R A R E 質(zhì)粒， 包含稀有密碼子； 含有BL21系列菌株中的lacZY基因突變，能夠通過IPTG高效控制目的基因的表達(dá)；含有溶源性的 λDE3，帶有T7 RNA聚合酶的染色體拷貝。

其基因型如下：

F– ompT hsdS B(rB–mB–) gal dcm lacY1aphC (DE3) gor522 ::Tn10 trxB pRARE(CamR, KanR, TetR)

低溫運(yùn)輸，-80℃保存，有效期一年。

Rosetta-gami B(DE3)菌種細(xì)菌的培養(yǎng)和收集：

將含有質(zhì)粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養(yǎng)12-24小時(shí)。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養(yǎng)基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養(yǎng)約12小時(shí)至對數(shù)生長后期。

Rosetta-gami B(DE3)菌種質(zhì)粒DNA少量快速提�。�

質(zhì)粒DNA小量提取法對于從大量轉(zhuǎn)化子中制備少量部分純化的質(zhì)粒DNA十分有用。這些方法共同特點(diǎn)是簡便、快速，能同時(shí)處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。

　Rosetta-gami B(DE3)菌種（一）、煮沸法

　　1、將1.5ml培養(yǎng)液倒入eppendorf管中,4℃下12000ｇ離心30秒。

　　2、棄上清，將管倒置于衛(wèi)生紙上幾分鐘，使液體流盡。

　　3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。

　　4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。

　　5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。

　　6、用微量離心機(jī)4℃下12000g離心10分鐘。

　　7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細(xì)菌碎片。

　　8、取20ml進(jìn)行電泳檢查。

XY83674    一管式病毒DNAOUT    50次|200次
DNA純化
XY83660    非凍型組織DNA保存液    100mL|250mL
XY860910    非凍型血液DNA保存液    100mL|250mL
XY890315    非凍型尿液DNA保存液    15mL|100mL
XY880802    非凍型拭子DNA保存液    100mL(A)|100mL(B)
XY8130924    口腔采樣拭子    50支
XY8130925    鼻腔采樣拭子    50支
XY8130926    DNA樣品采集拭子    50支
XY8130927    宮頸采樣拭子    50支(A)|50支(B)
XY870603    土壤腐殖酸清除劑    100mL
XY870302    一步離心式石蠟清除劑    100次
XY890901    菌體內(nèi)毒素清除劑    200mL
XY860403    紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化)    100mL
XY890309    紅細(xì)胞裂解液B型(流式細(xì)胞分析用)    100mL

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