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BL21-CodonPlus-RIL菌種產品及特點
BL21-CodonPlu系列菌株有助于解決密碼子偏倚性問題,細胞中帶有大腸桿菌稀有tRNA的額外基因拷貝,從而可以高水平表達許多在常規大腸桿菌宿主中難以表達或不能表達的蛋白。
BL21-CodonPlus–RIL細胞帶有額外拷貝的argU、ileY和leuW tRNA基因,解決了表達富含AT的基因組蛋白密碼子偏倚性
問題。
其基因型如下:
F- omp T hsd S(rB-mB-)dcm + Tetr galend A Hte [argU ile Y leu W Camr]
低溫運輸,-80℃保存,有效期一年。
BL21-CodonPlus-RIL菌種細菌的培養和收集:
將含有質粒pBS的DH5α菌種接種在LB固體培養基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培養12-24小時。用無菌牙簽挑取單菌落接種到5ml LB液體培養基(含50μg/ml Amp)中,37℃振蕩培養約12小時至對數生長后期。
BL21-CodonPlus-RIL菌種質粒DNA少量快速提取:
質粒DNA小量提取法對于從大量轉化子中制備少量部分純化的質粒DNA十分有用。這些方法共同特點是簡便、快速,能同時處理大量試樣,所得DNA有一定純度,可滿足限制酶切割、電泳分析的需要。
BL21-CodonPlus-RIL菌種(一)、煮沸法
1、將1.5ml培養液倒入eppendorf管中,4℃下12000g離心30秒。
2、棄上清,將管倒置于衛生紙上幾分鐘,使液體流盡。
3、將菌體沉淀懸浮于120ml STET溶液中, 渦旋混勻。
4、加入10ml新配制的溶菌酶溶液(10mg/ml), 渦旋振蕩3秒鐘。
5、將eppendorf管放入沸水浴中,50秒后立即取出。
6、用微量離心機4℃下12000g離心10分鐘。
7、用無菌牙簽從eppendorf管中去除細菌碎片。
8、取20ml進行電泳檢查。
XY70606一站式miRNA尿素-PAGE電泳套裝30次XY100205一站式DNA非變性PAGE電泳套裝30次XY51210超快核酸電泳液干粉20L|50LXY100211TAE電泳液,50×250mL|2500mLXY90313TBE電泳液,10×250mL|2500mLXY100816堿性膠電泳液,10×250mLXY3150RNA電泳液,10×100mL|250mLXY3690DNA上樣液,6×10mL(A)|10mL(B)XY3130三合一RNA上樣液1.5mL(A)|1.5mL(B)XY101222DNA堿性膠上樣液1.5mL|10mLXY70608miRNA尿素-PAGE上樣液1.5mL|10mLXY100874DNA尿素-PAGE上樣液1.5mL|10mLXY100875DNA 非變性PAGE上樣液1.5mL|10mLXY3280SYBR GreenⅠ,電泳級50μLXY61201耐熱型SYBR染料,電泳級50μLXY70303綠如藍核酸染料(UV型)0.5mL|1.5mLXY121002綠如藍核酸染料(可見光型)10mLXY81104超快核酸銀染試劑盒1000mLXY100808溴化乙錠干粉1gXY3180溴化乙錠溶液1.5mLXY3092溴化乙錠清除劑100次XY70503DNA電泳分子量標準50次