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OVISE 人卵巢癌細(xì)胞
英文名稱:總訪問:166
國產(chǎn)/進(jìn)口:國產(chǎn)半年訪問:49
產(chǎn)地/品牌:語純生物產(chǎn)品類別:細(xì)胞株/菌種
規(guī)       格:1×10^6 最后更新:2024-12-5
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  • 產(chǎn)品介紹
  • 公司簡介
細(xì)胞來源:國家資源庫細(xì)胞背景:OVISE 人卵巢癌細(xì)胞來源于一名40歲卵巢腫瘤IIb 期患者。
https://cellbank.nibiohn.go.jp//~cellbank/en/search_res_det.cgi?RNO=JCRB1043
細(xì)胞特性: 形態(tài):上皮細(xì)胞樣,貼壁生長。 用途:僅供科研使用。
培養(yǎng)條件:
1)準(zhǔn)備1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2)培養(yǎng)條件: 空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%
注意事項(xiàng):
一.消毒靜置等細(xì)胞穩(wěn)定后拍照100X和200X。棄去培養(yǎng)上清,用PBS潤洗細(xì)胞1-2次并吸走。
二. T25瓶加入0.25%EDTA胰蛋白酶1-2ml于培養(yǎng)瓶中震蕩混勻,如果屬于貼壁不牢固的細(xì)胞很容易脫落的就培養(yǎng)箱外面消化震蕩待脫落90%以上終止消化,一般小于1分鐘以內(nèi),甚至不加胰酶有部分貼壁非常不牢固的細(xì)胞也會(huì)自然震蕩脫落。如果是貼壁牢固的細(xì)胞則置于37℃培養(yǎng)箱中消化提高效率,每40-50秒拿出培養(yǎng)箱震蕩幫助細(xì)胞脫落,如脫落90%以上則對(duì)應(yīng)3-6ml含有10%血清的完全培養(yǎng)基終止徹底,以防胰酶殘留損傷細(xì)胞。如果貼壁非常牢固的細(xì)胞,脫落的比例比較低,也不超過2分鐘后終止消化徹底,再加入1ml完全培養(yǎng)基讓細(xì)胞緩沖后再過2分鐘進(jìn)行二次消化,反復(fù)分步消化以降低單次消化時(shí)長,減少刺激,保護(hù)細(xì)胞膜。或采用刮產(chǎn)刮細(xì)胞的方式處理也可以。總歸原則是達(dá)到消化目的的同時(shí)減少細(xì)胞膜受到的損傷越小越好。
三.消化完成后輕輕吹勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶/6cm培養(yǎng)皿中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2和以上比例進(jìn)行,具體以實(shí)際細(xì)胞密度決定。期間多的細(xì)胞一定保存多份細(xì)胞凍存管備種。
懸浮細(xì)胞參考:
大多數(shù)懸浮細(xì)胞對(duì)于環(huán)境比較敏感,建議一直維持高密度生長,一般情況下細(xì)胞密度維持在1×10 5到1×10 6個(gè)/mL(不同細(xì)胞對(duì)密度要求不同)。如需分瓶可以將細(xì)胞懸液收集到離心管中800-1000rpm,離心5min,棄去上清,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1:2的比例(首次可以1:1分瓶)分到新T25瓶中,添加5-6ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2和以上比例進(jìn)行。大多數(shù)血液類相關(guān)的懸浮細(xì)胞受運(yùn)輸影響比較大,會(huì)出現(xiàn)一批死細(xì)胞,如果因此密度降低了,可以離心后轉(zhuǎn)移至T25瓶中豎著培養(yǎng),培養(yǎng)基添加5ml 以提高總體密度,隔一天后觀察密度可以的話再補(bǔ)液3ml完全培養(yǎng)基后T25瓶放倒,等沉淀穩(wěn)定后觀察細(xì)胞密度,持續(xù)添加培養(yǎng)基等密度上升足夠傳代為止。
 
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