細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

膠質(zhì)纖維酸性蛋白 (GFAP)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2(mouse IGBPF-2)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(rat ACTH) ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
大鼠白介素 -1 a (rat IL-1 a )ELISA 規(guī)格：96T美國(guó) Biosource
晚期糖基化終末產(chǎn)物 (AGEs)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
尾加壓素 II(Human Urotensin II)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
基質(zhì)金屬蛋白酶 -8(MMP-8)ELISA 規(guī)格：96T美國(guó) R&D
大鼠氧化低密度脂蛋白(rat OxLDL)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
血清游離膽固醇（FC）含量測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
基質(zhì)金屬蛋白酶 -1(MMP-1)ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
磺胺噠嗪;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) CAS 80-32-0 規(guī)格： 0.25g 訂購(gòu)|咨詢(xún)
吡格列 CAS 112529-15-4 規(guī)格： 50mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
女貞苷 CAS 260413-62-5 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
黨參炔苷 CAS 136085-37-5 規(guī)格： 10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞；PUMC-mips-D3培養(yǎng)芹菜素-7-O-葡萄糖醛酸苷 CAS 29741-09-1 規(guī)格： 10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
沉香 CAS  規(guī)格： 1.0g 訂購(gòu)|咨詢(xún)
蘿卜素（98%） CAS 4478-93-7 規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
堿;EMetine Hydroc CAS  規(guī)格： 20mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
烏梅 CAS  規(guī)格： 2g 訂購(gòu)|咨詢(xún)
對(duì)葉百部堿 CAS 1818546 規(guī)格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購(gòu)|咨詢(xún)
對(duì)氨基水楊酸鈉 CAS  規(guī)格： 100mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
白頭翁對(duì)照藥材 CAS  規(guī)格： 1g 訂購(gòu)|咨詢(xún)

第一種：

是凍存產(chǎn)品，由液氮直接拿出，干冰運(yùn)輸給客戶(hù)。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因?yàn)閺?fù)蘇手法對(duì)于細(xì)胞狀態(tài)影響較大，一旦細(xì)胞狀態(tài)不好，很難說(shuō)是細(xì)胞自身不行，還是復(fù)蘇沒(méi)操作好；另外溫度對(duì)細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細(xì)胞儲(chǔ)存的zui好方式，快遞時(shí)間也很難控制，多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量；干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。

第二種：

是我們復(fù)蘇好細(xì)胞，QC通過(guò)后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶(hù)，排除復(fù)蘇造成影響，常溫運(yùn)輸也對(duì)細(xì)胞影響也不大，只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。

質(zhì)量保證：我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以?xún)?nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。

購(gòu)買(mǎi)客戶(hù)請(qǐng)先與我司細(xì)胞銷(xiāo)售人員核實(shí)訂購(gòu)的細(xì)胞名稱(chēng)、種屬、貨號(hào)、數(shù)量、協(xié)商細(xì)胞價(jià)格并預(yù)約發(fā)貨期與提取方式。向銷(xiāo)售人員索取細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并認(rèn)真閱讀以方便你的實(shí)驗(yàn)操作。