
細胞名稱
人神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2)說明書
形態特性 神經母細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 1972年11月從一們多次化療及放療的擴散性神經母細胞瘤患兒骨髓穿刺物中建立了SK-N-BE(2)神經母細胞瘤細胞株。 該細胞顯示中等水平的多巴胺-β-羥基酶活性。 有報道稱SK-N-BE(2)細胞的飽和濃度超過1x106細胞/平方厘米。細胞形態多樣,有的有長突觸,有的呈上皮細胞樣。 細胞會聚集,形成團塊并浮起。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(36+5)
凍存條件 完全培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10;D13S317:11;D16S539:9,11;D18S51:14,16;D19S433:12,13;D21S11:30,31,32.2;D2S1338:17,23;D3S1358:19;D5S818:12;D7S820:9,10;D8S1179:13,14;FGA:22,25;TH01:6,7;TPOX:8,11;vWA:18
同工酶
染色體
運輸和保存:
人神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2)說明書視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養瓶充滿完全培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
可以重發的情況有哪些?
(1)人神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2)說明書細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
(5)視具體情況而定。
出現問題,不予以重發的情況有哪些?
(1)人神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2)說明書客戶造成細胞污染,不重發;
(2)客戶不正確操作致細胞狀態不好,不重發;
(3)細胞狀態不好,未細胞培養前3天照片的,不重發;
(4)細胞培養時經其它處理的,不重發;
(5)細胞收到2天內,未告知,不重發;
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規則細胞,貼壁培養。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態,細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節約處就節約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍”,傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Natrexone 納曲酮抗體IgG 0.2ml
Cyp2-j3 細胞色素P450Ⅱj3抗體 0.2ml
Calretinin/CA 鈣結合蛋白抗體 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
ANKRD32 錨蛋白重復結構域蛋白32抗體 0.2ml
CDCA7 細胞分裂周期相關蛋白 0.2ml
Phospho-MDM2(Ser186) 磷酸化雙微體2癌基因抗體 0.1ml
Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗體 0.2ml
OVCA2 卵巢癌相關基因2蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM 兔抗大鼠IgM 1mg
Rabbit Anti-mouse IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
低分子量肝素 CAS 規格: 抗fxa1151IU/支 抗fIIa424IU/支 訂購|咨詢
麝香草酚 CAS 89-83-8 規格: 20mg 訂購|咨詢
苦馬;Swainsonine CAS 72741-87-8 規格: 1mg 訂購|咨詢
苦蒿素 CAS 125675-09-4 規格: 20mg 訂購|咨詢
次黃嘌呤核苷(肌酐);純品型;標準品;有 CAS 58-63-9 規格: 0.1g 訂購|咨詢
人神經母細胞瘤細胞;SK-N-BE(2)說明書表白樺脂酸 CAS 38736-77-5 規格: HPLC≥99%;20mg 訂購|咨詢
鳥嘌呤核苷(鳥苷) CAS 118-00-3 規格: 100mg 訂購|咨詢
補骨脂素; Psoralen CAS 66-97-7 規格: 20mg 訂購|咨詢
CAS 規格: 1g 訂購|咨詢
人參皂苷Rf CAS 52286-58-5 規格: 20mg 訂購|咨詢
葫蘆巴堿 CAS 6138-41-6 規格: 20mg 訂購|咨詢
乳糖;純品型;標準品;有證書 CAS 63-42-3 規格: 1g 訂購|咨詢