
細胞名稱
人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78說明書
形態(tài)特性 淋巴母細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞可產(chǎn)生IL-2,TNF-α;表達IL-2受體。H9 (ATCC HTB-176) 是HuT 78衍生出來的克隆。
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,20%
傳代方法 1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:8,12;D16S539:11,12;D18S51:18;D19S433:14;D21S11:30;D2S1338:20,25;D3S1358:15,16;D5S818:11,12;D7S820:8,11;D8S1179:12,14;FGA:21,25;TH01:8,9;TPOX:8,9;vWA:14,15
同工酶
染色體
運輸和保存:
人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78說明書視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78說明書細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78說明書客戶造成細胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細胞狀態(tài)不好,未細胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細胞特性:
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgM 0.1ml
Phospho-HSP27 (Ser254) 磷酸化熱休克蛋白27抗體 0.1ml
KLHDC9 KLHDC9蛋白抗體 0.2ml
CCBE1 膠原蛋白和鈣結(jié)合表皮生長因子結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml
PDLIM1 細胞骨架蛋白C端PDLIM1抗體 0.2ml
Phospho-Ack1(Tyr284) 磷酸化Ack1抗體 0.1ml
DAPK3/ZIP Kinase 凋亡相關(guān)蛋白激酶3抗體 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗猴IgG 0.1ml
Rabbit Anti-pig IgG/FITC FITC標記的兔抗豬IgG 0.3ml
MKRN2/RNF62 環(huán)指蛋白62抗體 0.2ml
Phospho-NMDAR2B (Ser1303) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 0.1ml
薤白對照藥材 CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
五味子丙素 CAS 61301-33-5 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
白花前胡丙素 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支; 訂購|咨詢
人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78說明書腺苷 CAS 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
葫蘆巴堿 CAS 6138-41-6 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
升素 CAS 37921-38-3 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
阿多弗林堿 CAS 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
酞酸甲酯;純品型;標準品;有證書 CAS 20098-41-3 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
對磷;純品型;標準品;有證書 CAS 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
荷葉堿 CAS 4 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
鳶尾黃素 CAS 548-77-6 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
橙皮素;Hesperetin CAS 520-33-2 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢