運輸和保存:
人前列腺癌細(xì)胞;VCaP圖片視天氣狀況和運輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

細(xì)胞名稱
人前列腺癌細(xì)胞;VCaP圖片
形態(tài)特性 上皮細(xì)胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 1997從一位不受激素影響的前列腺癌患者脊椎轉(zhuǎn)移灶中建立了這株細(xì)胞。先在小鼠中進(jìn)行異種移植傳代,隨后進(jìn)行體外培養(yǎng)。體內(nèi)及體外都對雄性激素敏感。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(39+5)
凍存條件 完全培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:11,12;D16S539:9;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:31;D2S1338:17,25;D3S1358:14,15;D5S818:12;D7S820:9,12;D8S1179:12,13;FGA:21,26;TH01:9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19
同工酶
染色體
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

HIV1 p55+p17/HIV1 Pr55Gag 艾滋病病毒抗體 0.2ml
Phospho-EphA2(Tyr594) 磷酸化酪氨酸蛋白激酶A2受體抗體 0.1ml
Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體 0.1ml
PCDHGA1 原鈣粘蛋白γA1抗體 0.2ml
MRPS4/IMP3 線粒體核糖體蛋白S4抗體 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.1ml
KLHL8 Kelch樣蛋白8抗體 0.2ml
Coronin 3 冠蛋白3抗體 0.2ml
GLUT4 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白4抗體 0.1ml
phospho-RPS6KA1(Thr359) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 0.1ml
EB3 微管相關(guān)蛋白EB家族3抗體 0.2ml
甜橙黃;Sinensetin CAS 2306-27-6 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
異槲皮苷;Isoquercitrin CAS 21637-25-2 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
紫花地丁 CAS 規(guī)格: 2g 訂購|咨詢
廣藿香油 CAS 2233340 規(guī)格: 1ml 訂購|咨詢
克羅寧 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
人前列腺癌細(xì)胞;VCaP圖片去氫木香內(nèi)酯 CAS 477-43-0 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
蛋白低分子量標(biāo)準(zhǔn)(SDS法) CAS 規(guī)格: 約3mg 訂購|咨詢
地奧司明 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
烏藥醇 ;lindenel CAS 26146-27-0 規(guī)格: 10mg 訂購|咨詢
葶藶子(獨行菜) CAS 規(guī)格: 0.5g 訂購|咨詢
土荊皮(金錢松) CAS 規(guī)格: 1g 訂購|咨詢
可可堿;Theobromine CAS 83-67-0 規(guī)格: 50mg 訂購|咨詢
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人前列腺癌細(xì)胞;VCaP圖片細(xì)胞運輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人前列腺癌細(xì)胞;VCaP圖片客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);