細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

ME1  胞漿蘋果酸酶1抗體 0.2ml
TGF Beta R1/TGFBR1  轉移生長因子β受體1抗體（TGF-βRⅠ） 0.2ml
TRPM5  瞬時受體電位離子通道蛋白5抗體（M亞家族） 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/HRP  辣根過氧化物酶標記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/RBITC  羅丹明標記的小鼠抗羊IgG 0.3ml
PCDHA11  原鈣粘蛋白11抗體 0.2ml
SPAC7/C13ORF28  頂端體相關蛋白7抗體 0.2ml
MCT1  單羧酸轉運蛋白-1抗體 0.2ml
TIP47/M6PRBP1  脂滴相關蛋白TIP47抗體 0.2ml
MLK2/MAP3K10  絲裂原活化蛋白激酶3K10抗體 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG  兔抗人IgG 1mg
L-異亮氨酸 CAS 73-32-5 規格： 20mg 訂購|咨詢
白樺脂醇;Betulin CAS 473-98-3 規格： 20mg 訂購|咨詢
紫堇靈 CAS 18797-79-0 規格： 20mg 訂購|咨詢
泰樂菌素 標準品 CAS  規格： 100mg 訂購|咨詢
人喉癌上皮細胞；Hep-2培養人參二醇 CAS 19666-76-3 規格： HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
蓮子心 CAS  規格： 3g 訂購|咨詢
α-香附 CAS 473-08-5 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
霹靂蘿芙木堿 CAS 4382-56-3 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
日蟾蜍他靈 CAS 465-11-2 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
亞油酸甲酯 CAS 112-63-0 規格： 0.2ml 訂購|咨詢
白綿馬素AA CAS 3570-40-9 規格： 10mg 訂購|咨詢
千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯 CAS 218916-52-0 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。