細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

GPRIN3  G蛋白調節誘導神經突增生蛋白3抗體 0.2ml
BTG3  高表達神經上皮蛋白BTG3抗體 0.2ml
RRAD  RRAD抗體 0.2ml
CD8  CD8抗體 0.1ml
DNA PK/PRKDC  DNA依賴性蛋白激酶抗體 0.2ml
AF 4 protein  原癌基因AF4蛋白抗體 0.2ml
Anterior Gradient 2  前梯度同源蛋白2抗體 0.1ml
CC85C  卷曲螺旋域蛋白質85C抗體 0.2ml
RAB6B  RAS癌基因相關蛋白RAB6B抗體 0.1ml
phospho-SHC(Tyr349)  磷酸化SH2結構域轉化蛋白1抗體 0.1ml
PLC β2/Phospholipase C beta 2  磷酯酶Cβ2抗體 0.2ml
人絕經尿促性腺素 (HMG) CAS  規格：  訂購|咨詢
遼東楤木皂苷VII CAS  規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
丙氨酸 CAS 338-69-2 規格： 20mg 訂購|咨詢
;純品型;標準品;有證書 CAS  規格： 0.1g 訂購|咨詢
獨活素 CAS 2880-49-1 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
萊苞迪甙A CAS 58543-16-1 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
人肝腹水腺癌細胞；SK-HEP-1培養巴蘇木素 CAS 474-07-7 規格： 20mg 訂購|咨詢
羊藿次苷I CAS 56725-99-6 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
三七皂苷R1 CAS 80418-24-2 規格： 20mg 訂購|咨詢
木蘭脂素;maglin CAS 31008-18-1 規格： 20mg 訂購|咨詢
三葉豆紫檀苷 CAS 6807-83-6 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
別隱品堿;Allocryptopine CAS 485-91-6 規格： 20mg 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。