人脛骨肉瘤細(xì)胞；U-2 OS圖片視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍”，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

p22-phox/Cytochrome b245 Light Chain  細(xì)胞色素b245輕鏈抗體 0.1ml
CD158b2  NK細(xì)胞抑制性受體2DL3抗體 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/FITC  FITC標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM 0.3ml
VGLL2  轉(zhuǎn)錄輔助因子退變樣蛋白2抗體 0.2ml
FAM161A  FAM161A蛋白抗體 0.2ml
c-Myb  轉(zhuǎn)錄激活因子MYB抗體 0.2ml
Hepcidin-25  鐵調(diào)節(jié)蛋白25抗體 0.2ml
ABI1  ABI1/SSH3BP1蛋白抗體 0.1ml
Mouse Anti-Rabbit IgM/PE  PE標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml
Hyaluronidase-PH20/Haase  透明質(zhì)酸酶/玻璃酸酶抗體 0.1ml
C11orf53  11號(hào)染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml
雷公藤次堿 CAS 11088-09-8 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
通關(guān)藤苷H;Tenacissoside CAS 191729-45-0 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
紅曲（特殊發(fā)酵） CAS  規(guī)格： 1g 訂購|咨詢
甘油三油酸酯 CAS 122-32-7 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
人脛骨肉瘤細(xì)胞；U-2 OS圖片DL-丁香樹脂酚 CAS 1177-14-6 規(guī)格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
白蠟樹素 CAS 6035-49-0 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
3-表熊果酸;3-Epiursolic CAS 989-30-0 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
乙氧基白屈菜紅堿 CAS 79559-55-0 規(guī)格： HPLC≥95%;20mg 訂購|咨詢
寶藿苷Ⅰ CAS 113558-15-9 規(guī)格： 20mg 訂購|咨詢
(+)2-氨基丁醇 CAS 13054-87-0 規(guī)格： 100mg 訂購|咨詢
正 CAS  規(guī)格： 1ml 訂購|咨詢
維生素K3 CAS 58-27-5 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

（1）人脛骨肉瘤細(xì)胞；U-2 OS圖片細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失、破損、漏液等，重發(fā)；

（2）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（3）存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，重發(fā)；

（4）凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封，出現(xiàn)污染，重發(fā)；

（5）視具體情況而定。

（1）人脛骨肉瘤細(xì)胞；U-2 OS圖片客戶造成細(xì)胞污染，不重發(fā)；

（2）客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)；

（3）細(xì)胞狀態(tài)不好，未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的，不重發(fā)；

（4）細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的，不重發(fā)；

（5）細(xì)胞收到2天內(nèi)，未告知，不重發(fā)；