
細(xì)胞名稱
人肝癌細(xì)胞系;HCCIH03說明書
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
人肝癌細(xì)胞系;HCCIH03說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肝癌細(xì)胞系;HCCIH03說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)人肝癌細(xì)胞系;HCCIH03說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

Caveolin-1 細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 0.1ml
CAMK2D/CaMKII delta 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2D(CaMKIIδ) 0.2ml
USP1 泛素特異性蛋白酶1抗體 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml
Mouse Anti-Goat IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 2ml
UXT/Ubiquitously expressed transcript 廣泛表達(dá)轉(zhuǎn)錄蛋白UXT抗體 0.2ml
Phospho-Stathmin(Ser38) 磷酸化原癌基因蛋白18抗體 0.1ml
Collagen VI alpha 1 抗Ⅵ型膠原抗體 0.1ml
RAD9 細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 0.1ml
Phospho-YAP1(Tyr407) 磷酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
FBXW12/FBXO35 FBXW12蛋白抗體 0.2ml
槐定堿 CAS 641-39-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
植酸鈉;Sodium phytate CAS 14306-25-3 規(guī)格: 25mg 訂購|咨詢
格列風(fēng)內(nèi)酯 CAS 61371-55-9 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
蜂房 CAS 規(guī)格: 0.5g 訂購|咨詢
丹酚酸C CAS 115841-09-3 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
伽升沃 D CAS 107390-08-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
人肝癌細(xì)胞系;HCCIH03說明書避蚊胺;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 134-62-3 規(guī)格: 0.1g 訂購|咨詢
羅漢果皂甙V;羅漢果皂苷V;羅漢果甜苷V CAS 88901-36-4 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支 訂購|咨詢
五味子酯甲;Schisantherin CAS 58546-56-8 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
侖氨林 CAS 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
4-甲氧基水楊酸 CAS 2237-36-7 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
飛蓬酯乙 CAS 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢