
細(xì)胞名稱
肝癌細(xì)胞株;LM3說明書
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞屬專利保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
運(yùn)輸和保存:
肝癌細(xì)胞株;LM3說明書視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
可以重發(fā)的情況有哪些?
(1)肝癌細(xì)胞株;LM3說明書細(xì)胞運(yùn)輸途中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失、破損、漏液等,重發(fā);
(2)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(3)存活的細(xì)胞靜置24小時(shí)后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,重發(fā);
(4)凍存的細(xì)胞復(fù)蘇后或存活的細(xì)胞靜置4小時(shí)后并且未開封,出現(xiàn)污染,重發(fā);
(5)視具體情況而定。
出現(xiàn)問題,不予以重發(fā)的情況有哪些?
(1)肝癌細(xì)胞株;LM3說明書客戶造成細(xì)胞污染,不重發(fā);
(2)客戶不正確操作致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā);
(3)細(xì)胞狀態(tài)不好,未細(xì)胞培養(yǎng)前3天照片的,不重發(fā);
(4)細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理的,不重發(fā);
(5)細(xì)胞收到2天內(nèi),未告知,不重發(fā);
細(xì)胞特性:
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):
(1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對數(shù)生長期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入完全培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格,我從10%-90%都用過,問題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關(guān)于“慢凍”,傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

CK7(human) 細(xì)胞角蛋白7抗體(人) 0.2ml
P-selectin/CD62p P選擇素抗體 0.1ml
RBFA 核糖體結(jié)合因子RBFA抗體 0.2ml
IQCA1 IQCA1蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Anti-rat IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 0.1ml
PLC β1/Phospholipase C beta 1 磷酯酶Cβ1抗體 0.2ml
Thyroxine Binding Globulin/TBG/Serpin A7 甲狀腺素結(jié)合球蛋白抗體 0.2ml
PCNA(1C11) 小鼠增殖細(xì)胞核抗原單克隆抗體 0.1ml
PH-4/P4H-TM 脯氨酸水解酶4抗體 0.2ml
phospho-GIT1(Tyr554) 磷酸化G蛋白偶聯(lián)受體激酶相互作用蛋白1 0.1ml
C19orf45 19號染色體開放閱讀框45抗體 0.2ml
補(bǔ)骨脂定 CAS 18642-23-4 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
原人參二醇 CAS 30636-90-9 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
格列苯脲 CAS 10238-21-8 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
合成辣椒堿 CAS 2444-46-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
肝癌細(xì)胞株;LM3說明書酸氫吡格雷 CAS 135046-48-9 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
山崳酸甘油酯 CAS 規(guī)格: 500mg 訂購|咨詢
阿馬堿;Raubasine CAS 483-04-5 規(guī)格: 100mg 訂購|咨詢
牛膝甾 CAS 15130-85-5 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
吳茱萸次堿 CAS 84-26-4 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
遼東楤木皂苷Ⅴ CAS 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢
當(dāng)藥寧 CAS 20882-75-1 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
茶多酚;Tea polyphel CAS 84650-60-2 規(guī)格: 20mg 訂購|咨詢