細胞培養操作規程：

一．培養基及培養凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。

2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

ILT2/CD85j  細胞表面免疫球蛋白樣轉錄因子2抗體 0.2ml
C12ORF49  12號染色體開放閱讀框49抗體 0.2ml
Proteasome 20S alpha 3  蛋白酶體PSMα3抗體 0.2ml
Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254)  磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節性硬化)抗體 0.1ml
Bestrophin 4  卵黃狀黃斑病蛋白4抗體 0.2ml
Mimitin  MYC誘導線粒體蛋白抗體 0.2ml
HOXA10  HOXA10抗體 0.1ml
DcR1  腫瘤壞死因子配體超家族成員10C 0.1ml
CCL26/Eotaxin 3  嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體 0.2ml
phospho-STAT5a(Tyr694)  磷酸化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體 0.1ml
TSHB(2T11)  促甲狀腺素單克隆抗體 0.1ml
Alfa-葡萄素;alpha-Vinif CAS 62218-13-7 規格： 10mg 訂購|咨詢
4-磺酰胺基鹽 CAS 27918-19-0 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
異香蘭酸 CAS 645-08-9 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
角鯊烷 CAS  規格： 約0.3ml 訂購|咨詢
野漆樹苷 CAS 17306-46-6 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
10-甲氧基喜樹堿;10-Methoxy CAS  規格： 20mg 訂購|咨詢
人源口腔鱗狀細胞癌細胞系；TSCC1培養細葉遠志皂苷;Tenuifolin CAS 20183-47-5 規格： 20mg 訂購|咨詢
二苯基－（2－苯基)甲醇 CAS  規格： 50mg 訂購|咨詢
梧桐子 CAS  規格： 5g 訂購|咨詢
苯磺酸氨地平 CAS 111470-99-6 規格： 100mg 訂購|咨詢
升醇-3-O-α-L-拉伯糖苷 CAS 161207-05-2 規格： HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
通關藤皂苷H CAS 191729-45-0 規格： HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

第一種：

是凍存產品，由液氮直接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態影響較大，一旦細胞狀態不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。

第二種：

是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。

質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。

購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的細胞名稱、種屬、貨號、數量、協商細胞價格并預約發貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。